Доработанный текст проекта Приказа Министерства сельского хозяйства РФ "Об утверждении Методики производства молекулярно-генетического исследования генно-инженерно-модифицированных организмов, используемых для производства кормов и кормовых добавок для животных, а также кормов и кормовых добавок для животных, полученных с применением таких организмов или содержащих такие организмы" (подготовлен Минсельхозом России 30.07.2018)

Досье на проект

В соответствии с пунктом 13 Правил государственной регистрации генно-инженерно-модифицированных организмов, предназначенных для выпуска в окружающую среду, а также продукции, полученной с применением таких организмов или содержащей такие организмы, утвержденных постановлением Правительства Российской Федерации от 23.09.2013 N 839 (Собрание законодательства Российской Федерации, 2013, N 39, ст. 4991; 2014, N 25, ст. 3317; 2017, N 28, ст. 4145; 2018, N 6, ст. 896), приказываю:

Утвердить прилагаемую Методику производства молекулярно-генетического исследования генно-инженерно-модифицированных организмов, используемых для производства кормов и кормовых добавок для животных, а также кормов и кормовых добавок для животных, полученных с применением таких организмов или содержащих такие организмы.

Министр

Д.Н. Патрушев

Приложение
УТВЕРЖДЕНА
приказом Минсельхоза России
от N    

Методика
производства молекулярно-генетического исследования генно-инженерно-модифицированных организмов, используемых для производства кормов и кормовых добавок для животных, а также кормов и кормовых добавок для животных, полученных с применением таких организмов или содержащих такие организмы

I. Общие положения

1.1. Настоящая методика устанавливает порядок проведения молекулярно-генетического исследования генно-инженерно-модифицированных организмов, используемых для производства кормов и кормовых добавок для животных, а также кормов и кормовых добавок для животных, полученных с применением таких организмов или содержащих такие организмы (далее - исследование, ГМО, продукция).

1.2. Исследование проводится организациями (испытательными лабораториями), аккредитованными в национальной системе аккредитации, в отношении ГМО, предназначенного для выпуска в окружающую среду в целях проверки данных о молекулярно-генетической структуре и генетической модификации ГМО, оценки эффективности метода идентификации ГМО либо подтверждения присутствия в продукции заявленного ГМО.

1.3. Результаты исследования ГМО оформляются заключением о результатах исследования, составляемым на основании протоколов испытаний, которое должно содержать:

наименование заключения;

полное наименование и место нахождения организации (испытательной лаборатории), осуществившей проведение исследования;

наименование ГМО с указанием его таксономического статуса;

полное наименование и место нахождения, идентификационный номер налогоплательщика (ИНН) юридического лица, осуществляющего на территории Российской Федерации генно-инженерную деятельность в целях создания ГМО (далее - заявитель ГМО);

полное наименование и место нахождения юридического лица либо фамилия, имя, отчество (при наличии), место жительства индивидуального предпринимателя - изготовителя образцов ГМО;

вид предполагаемого целевого использования ГМО;

место и номер депонирования (указывается для депонированных штаммов ГМО);

сведения о трансформационном событии в виде кода, сформированного согласно Общероссийскому классификатору трансформационных событий;

регистрационный номер свидетельства о государственной регистрации ГМО, предназначенного (предназначенных) для выпуска в окружающую среду, на основе которого (которых) создан ГМО, в отношении которого проведена экспертиза (в случае если ГМО создан на основе иного (иных) ГМО) либо указание на то, что ГМО не создан на основе иного (иных) ГМО;

регистрационный номер свидетельства о государственной регистрации ГМО для иного целевого использования (при наличии);

сведения о регистрации ГМО за рубежом (при наличии);

оценку полноты документов и данных представленных заявителем ГМО для исследования;

краткое содержание документов и данных, представленных заявителем ГМО для исследования;

описание образцов ГМО и исходного организма-реципиента, представленных заявителем ГМО для исследования с указанием их количества, а также оценку их пригодности для проведения исследования;

выводы о результатах исследования: о молекулярно-генетической структуре ГМО, об отсутствии или наличии не заявленных генетических конструкций; об эффективности метода идентификации ГМО, сведения о соответствии генетической модификации природным (естественным) процессам;

фамилии, имена, отчества (при наличии), должности, места работы, ученые степени (при наличии) лиц, проводивших исследование;

дату и номер заключения;

подпись руководителя организации (испытательной лаборатории), осуществившей проведение исследования.

При экспертизе ГМО для производства кормов и кормовых добавок, содержащих и/или полученных с использованием ГМО растительного происхождения, представляется информация о стандартных (референтных) материалах для идентификации и количественного определения ГМО: наименование стандарта (шифр), источник получения (с указанием ссылки на Интернет-ресурс и адрес производителя).

Протоколы испытаний подписываются руководителями испытательных лабораторий и являются неотъемлемой частью заключения.

Протокол, оформленный по результатам проверки (валидации) методики идентификации ГМО, подписывается руководителем организации (испытательной лаборатории), осуществившей проведение экспертизы и является неотъемлемой частью заключения.

1.4. Результаты исследования продукции оформляются заключением о результатах исследования, составляемым на основании протоколов испытаний, которое должно содержать:

наименование заключения;

полное наименование и местонахождение организации (испытательной лаборатории), осуществившей проведение исследования;

наименование продукции;

полное наименование и место нахождения юридического лица, осуществляющее изготовление (поставку) продукции (далее - заявитель продукции);

регистрационный номер свидетельства о государственной регистрации ГМО, с применением которого получена продукция или который она содержит (указывается регистрационный номер свидетельства о государственной регистрации каждого ГМО, содержащегося в продукции или с применением которого она получена);

специальные условия использования ГМО, с применением которого получена продукция или который она содержит (при наличии);

сведения о регистрации продукции за рубежом (при наличии);

компонентный состав продукции, включая информацию о количестве ГМО (доля содержания в %);

оценка полноты представленных на экспертизу документов и данных, представленных заявителем продукции для исследования;

краткое содержание документов и данных, представленных заявителем продукции для исследования;

описание образцов продукции, представленных заявителем продукции для исследования с указанием их количества, а также оценку их пригодности для проведения исследования;

выводы о наличии или отсутствии заявленного ГМО в образцах продукции;

фамилии, имена, отчества (при наличии), должности, места работы, ученые степени (при наличии) лиц, проводивших исследование;

дату и номер заключения;

подпись руководителя организации (испытательной лаборатории), осуществившей проведение исследования;

рекомендуемый срок действия свидетельства о государственной регистрации продукции, не превышающий срок действия свидетельств(а) о государственной регистрации ГМО с применением которого(ых) получена продукция или который(ые) она содержит. Если продукция получена или содержит несколько ГМО, рекомендуемый срок действия свидетельства о государственной регистрации продукции не может превышать минимальный срок действия свидетельства о регистрации ГМО, с применением которого продукция получена или которые продукция содержит.

1.5. К заключению о результатах исследования ГМО или продукции должны прилагаться протоколы испытаний, на основании которых составлено соответствующее заключение, подписанные лицами, проводившими испытания.

1.6. Требования к проведению исследования приведены в приложении к настоящей методике.

II. Исследование ГМО, являющихся микроорганизмами

2.1. В рамках исследования осуществляется анализ представленных заявителем ГМО документов и данных:

а) наименования ГМО с указанием его таксономического статуса;

б) полного наименования и места нахождения, идентификационного номера налогоплательщика (ИНН) заявителя ГМО;

в) полного наименования и место нахождения юридического лица либо фамилия, имя, отчество (при наличии), места жительства индивидуального предпринимателя - изготовителя образцов ГМО;

г) вид предполагаемого целевого использования ГМО;

д) сведений об исходном организме-реципиенте (таксономическая характеристика с указанием метода идентификации);

е) сведений о трансформационном событии в виде кода, сформированного согласно Общероссийскому классификатору трансформационных событий;

ж) информации об организмах-донорах вносимых генов (с указанием группы патогенности при наличии);

з) описания структуры генетической конструкции (внесенной или удаленной) и места ее локализации, характеристики встроенных или измененных генов;

и) информации о генетической модификации: описания метода модификации, структуры вектора, структуры вставки, расположении рекомбинантной ДНК (хромосома, плазмида, мобильные элементы), включая фланкирующие последовательности, включение в состав мобильных генетических элементов;

к) регистрационного номера свидетельства о государственной регистрации ГМО, предназначенного (предназначенных) для выпуска в окружающую среду, на основе которого (которых) создан ГМО, в отношении которого проведена экспертиза (в случае если ГМО создан на основе иного (иных) ГМО) либо указания на то, что ГМО не создан на основе иного (иных) ГМО;

л) описания методики, позволяющей идентифицировать генетическую модификацию, в том числе описание нуклеотидных последовательностей используемых праймеров, зондов и условий полимеразной цепной реакции (ПЦР);

м) информации о депонировании штамма ГМО с указанием места и номера депонирования (для депонированных штаммов ГМО);

н) регистрационного номера свидетельства о государственной регистрации ГМО для иного целевого использования (при наличии);

о) информации о регистрации ГМО за рубежом (при наличии);

п) данных полногеномного секвенирования ГМО (при наличии).

2.2. В рамках исследования осуществляются следующие испытания представленных заявителем образцов ГМО и исходного организма-реципиента:

а) проверка (валидация) методики идентификации ГМО, в том числе оценка чувствительности и специфичности данной методики в соответствии с критериями эффективности методики идентификации ГМО, указанными в таблице N 3 приложения к настоящей методике;

б) подтверждение присутствия (отсутствия) заявленной генетической модификации в геноме микроорганизма;

в) подтверждение присутствия (отсутствия) генетических последовательностей в геноме ГМО, указанных в таблице N 1 приложения к настоящей методике;

г) проведение полногеномного секвенирования жизнеспособного ГМО (в случае непредставления заявителем ГМО сведений о полногеномном секвенировании жизнеспособного ГМО).

2.3. Срок проведения исследования не должен превышать 90 рабочих дней с момента представления заявителем ГМО документов и данных, предусмотренных пунктом 2.1. настоящей методики, а также образцов ГМО и исходного организма-реципиента, в количестве, необходимом для проведения исследования.

2.4. В случае соответствия методики идентификации ГМО критериям эффективности (в соответствии с Приложением N1 Таблица 3 п.1), а также подтверждения присутствия заявленных и отсутствия незаявленных генетических модификаций в исследованном ГМО по результатам экспертизы организацией, проводящей экспертизу, выдается заключение.

2.5. В случаях, не предусмотренных пунктом 2.4. настоящей Методики, выдается заключение о невозможности государственной регистрации исследуемого ГМО.

2.6. Если заявителем не представлены документы и данные, предусмотренные подпунктами "а"-"м" пункта 2.1. настоящей методики, и (или) образцы ГМО и исходного организма-реципиента, пригодные для проведения исследований, в количестве, необходимом для проведения исследований, исследование не должно проводиться. Заявителю должен быть выдан мотивированный отказ в проведении исследования, подписанный руководителем организации (испытательной лабораторией), аккредитованной в национальной системе аккредитации, в которую обратился заявитель для проведения исследования, в срок, не превышающий 20 рабочих дней с момента обращения заявителя в указанную организацию.

III. Исследование ГМО растительного происхождения

3.1 В рамках исследования осуществляется анализ представленных заявителем ГМО документов и данных, предусмотренных подпунктами "а"-"л" пункта 2.1. настоящей методики, а также данных секвенирования вставки ГМО и бордерных последовательностей, не менее 100 нуклеотидов по флангам генома реципиента (при наличии).

3.2. В рамках исследования осуществляется следующие испытания предоставленных заявителем образцов ГМО и его немодифицированного аналога:

а) проверка (валидация) методики идентификации ГМО, в том числе оценка чувствительности и специфичности данной методики в соответствии с критериями эффективности методики идентификации ГМО, указанными в таблице N 3 приложения к настоящей методике);

б) подтверждения присутствия (отсутствия) заявленной генетической модификации в геноме ГМО;

в) подтверждения присутствия (отсутствия) генетических последовательностей в геноме ГМО, указанных в таблице N 2 приложения к настоящей методике.

3.3. Срок проведения исследования не должен превышать 90 рабочих дней с момента представления заявителем ГМО документов и данных, предусмотренных пунктом 3.1. настоящей методики, а также образцов ГМО и его немодифицированного аналога, в количестве, необходимом для проведения исследования.

3.4. В случае соответствия методики идентификации ГМО критериям эффективности (в соответствии с Приложением N1 Таблица 3 п.1), а также подтверждения присутствия заявленных и отсутствия незаявленных генетических модификаций в исследованном ГМО по результатам экспертизы организацией, проводящей экспертизу, выдается заключение.

3.5. В случаях, не предусмотренных пунктом 3.4. настоящей Методики, выдается заключение о невозможности государственной регистрации исследуемого ГМО.

3.6. Если заявителем не представлены документы и данные, предусмотренные подпунктами "а"-"л" пункта 2.1. настоящей методики, и (или) образцы ГМО и его немодифицированного аналога, пригодные для проведения исследований, в количестве, необходимом для проведения исследований, исследование не должно проводиться. Заявителю должен быть выдан мотивированный отказ в проведении исследования, подписанный руководителем организации (испытательной лабораторией), аккредитованной в национальной системе аккредитации, в которую обратился заявитель для проведения исследования, в срок, не превышающий 20 рабочих дней с момента обращения заявителя в указанную организацию.

IV. Исследование ГМО животного происхождения

4.1 В рамках исследования осуществляется анализ представленных заявителем ГМО документов и данных, предусмотренных подпунктами "а"-"л" пункта 2.1. настоящей методики, а также данных секвенирования вставки ГМО и бордерных последовательностей, не менее 100 нуклеотидов по флангам генома реципиента (при наличии).

4.2. В рамках исследования осуществляется следующие испытания предоставленных заявителем образцов ГМО и его немодифицированного аналога:

а) проверка (валидация) методики идентификации ГМО, в том числе оценка чувствительности и специфичности данной методики в соответствии с критериями эффективности методики идентификации ГМО, указанными в таблице N 3 приложения к настоящей методике);

б) подтверждения присутствия (отсутствия) заявленной генетической модификации в геноме ГМО;

в) подтверждения присутствия (отсутствия) незаявленных генетических последовательностей в геноме ГМО.

4.3. Срок проведения экспертизы не должен превышать 90 рабочих дней с момента представления заявителем ГМО документов и данных, предусмотренных пунктом 4.1. настоящей методики, а также образцов ГМО и его немодифицированного аналога, в количестве, необходимом для проведения исследования.

4.4. В случае соответствия методики идентификации ГМО критериям эффективности (в соответствии с Приложением N1 Таблица 3 п.1), а также подтверждения присутствия заявленных и отсутствия незаявленных генетических модификаций в исследованном ГМО по результатам экспертизы организацией, проводящей экспертизу, выдается заключение.

4.5. В случаях, не предусмотренных пунктом 4.4. настоящей Методики, выдается заключение о невозможности государственной регистрации исследуемого ГМО.

4.6. Если заявителем не представлены документы и данные, предусмотренные подпунктами "а"-"л" пункта 2.1. настоящей методики, и (или) образцы ГМО и его немодифицированного аналога, пригодные для проведения исследований, в количестве, необходимом для проведения исследований, исследование не должно проводиться. Заявителю должен быть выдан мотивированный отказ в проведении исследования, подписанный руководителем организации (испытательной лабораторией), аккредитованной в национальной системе аккредитации, в которую обратился заявитель для проведения исследования, в срок, не превышающий 20 рабочих дней с момента обращения заявителя в указанную организацию.

V. Исследование продукции

5.1. В рамках исследования осуществляется анализ представленных заявителем продукции документов и данных:

а) наименование продукции;

б) полного наименования и места нахождения заявителя продукции);

в) регистрационного номера свидетельства о государственной регистрации ГМО с применением которого получена продукция или который она содержит (указывается регистрационный номер свидетельства о государственной регистрации каждого ГМО, содержащегося в продукции или с применением которого она получена);

г) компонентного состава продукции, включая информацию о количестве ГМО, присутствующего (присутствующих) в продукции (доля содержания в %);

д) описания методики, позволяющей идентифицировать генетическую модификацию, в том числе описание нуклеотидных последовательностей используемых праймеров, зондов, и условий ПЦР;

е) специальных условий использования ГМО, с применением которого получена продукция или который она содержит (при наличии);

ж) информации о регистрации продукции за рубежом (при наличии).

5.2. В рамках исследования осуществляется следующие испытания предоставленных заявителем образцов продукции:

а) проведение скрининга для подтверждения присутствия заявленных и отсутствия незаявленных генетических модификаций в предоставленных заявителем образцах продукции, в том числе указанных в таблице N 1 и N 2 приложения к настоящей методике, в зависимости от вида ГМО в составе продукции;

б) проведение идентификации заявленного в составе ГМО для подтверждения его присутствия (отсутствия);

в) проверка (валидация) присутствия (отсутствия) незаявленных ГМО в образцах продукции.

5.3. Срок проведения исследования не может превышать 30 рабочих дней с момента представления заявителем документов и данных, предусмотренных пунктом 5.1. настоящей Методики и образцов продукции.

5.4. В случае подтверждения присутствия (отсутствия) заявленного в составе ГМО в предоставленных заявителем образцах продукции при проведении скрининга в соответствии с п. 5.2 подпунктом "а" и идентификации в соответствии с п. 5.2 подпунктом "б" выдается заключение.

5.5. В случаях, не предусмотренных пунктом 5.4. настоящей Методики, выдается заключение о невозможности государственной регистрации исследуемой продукции.

5.6. Если заявителем продукции не представлены документы и данные, предусмотренные подпунктами "а"-"д" пункта 5.1. настоящей методики, и (или) образцы продукции, пригодные для проведения исследований, в количестве, необходимом для проведения исследований, исследование не должно проводиться. Заявителю продукции должен быть выдан мотивированный отказ в проведении исследования, подписанный руководителем организации (испытательной лабораторией), аккредитованной в национальной системе аккредитации, в которую обратился заявитель для проведения исследования, в срок, не превышающий 20 рабочих дней с момента обращения заявителя в указанную организацию.

Приложение
к методике производства молекулярно-генетического исследования
генно-инженерно-модифицированных организмов, используемых
для производства кормов и кормовых добавок для животных,
а также кормов и кормовых добавок для животных, полученных
с применением таких организмов или содержащих такие организмы

Таблица N 1. Часто используемые маркерные и селективные гены, являющиеся составляющими частями генно-инженерных конструкций микроорганизмов

Мишень	Описание
Ген LacZ	Кодирует фермент b-галактозидазу. Используется в векторных плазмидных конструкциях (pCR2.1TOPO, pVIK112, рBSKSII и других), включает область полилинкера для клонирования рекомбинантных генов. При наличии данного фермента бесцветный субстрат X-gal превращается в окрашенный продукт, бактериальные колонии, экспрессиирующие LacZ, имеют голубой цвет.
Ген gfp	Ген зелёного флуоресцентного  белка используется в ряде  векторных плазмид  для генно-инженерных манипуляций (pKEN-gfpmut2, pRK415-gfp) в качестве  светящейся метки.
Ген amp	Кодирует устойчивость к ампициллину, используется в ряде  векторных плазмид для селекции по антибиотикоустойчивости (pBR322, рUC18, pBSKSII,  рЕТ, pCR2.1 TOPO).
Ген Km	Кодирует устойчивость к канамицину, используется в ряде  векторных плазмид для селекции по антибиотикоустойчивости (pVIK112, pMC212).
Ген tetO	Кодирует устойчивость к тетрациклину, используется в ряде  векторных плазмид для селекции по антибиотикоустойчивости (pBR322).
F1 ori	Ориджин репликации плазмид   (pBSKSII, pKEN-gfpmut2, pCR2.1 TOPO).
Транспозон Tn7L	Фрагмент обеспечивает транспозицию рекомбинантных генов из плазмид в геном (pRK415-gfp).
Ген ermC	Кодирует устойчивость к эритромицину, плазмидные вектора.
Ген сat	Кодирует устойчивость к  хлорамфениколу, плазмидные вектора.
R6K ori	Ориджин репликации плазмид (pVIK112).

Таблица N 2. Часто используемые генетические последовательности в геноме ГМО растительного происхождения

ПЦР мишень	ГМ линии сои, кукурузы и рапса содержащие данный элемент
Промотор р-CaMV35S	GTS 40-3-2, A2704-12, A5547-127, BT 176, BT11, MON810, GA21, MON88017, NK603, MON863, T25, Т45
Терминатор t-NOS	GTS 40-3-2, MON863, MON531, MON757, MON1076, MON1445, MON1698, MON15985, BT11, GA21, NK603, MON802, 3272, MIR604, MON88017
Промотор р-FMV	MON89788, MON89034, GT73 и др.
Промотор p-SSuAra	MS1, RF1, RF2, MS8xRF3 и др.
Промотор p-TA29	MS1, RF1, RF2, MS8xRF3 и др.
Промотор p-NOS	MS1, RF1, RF2, Topas 19-2 и др.
Терминатор t-E9	MON89788 и др.
Терминатор t-35S	BT 176, Т14, Т25, 3272, A2704-12, A5547-127, Т45, Topas19/2 и др.
Терминатор t-OCS	MS1, RF1, RF2 и др.
Терминатор t-g7	MS1, RF1, RF2, MS8xRF3 и др.
Ген pat	TC1507, 59122 A2704-12, A5547-127, T25, T45, Bt11, DAS-59132-8, 281-24-236 Topas 19/2, DAS-44406-6, SYHT0H2, MZHG0JG, MON 87419 и др.

Выявление регуляторных элементов и целевых генов, используемых для получения ГМО растительного происхождения, осуществляется в соответствии с национальными и (или) межгосударственными стандартами, действующими в Российской Федерации.

Таблица N 3. Критерии эффективности методики идентификации ГМО

N	Характеристика	Описание характеристики	Критерий	Методы оценки критерия
1	Специфичность ПЦР	Способность ПЦР тест-системы выявлять только целевую ДНК.	ПЦР тест-система должна выявлять целевую ДНК. ПЦР тест-система не должна давать ложноположительных результатов, в том числе выявлять ДНК близкородственных и неродственных биологических видов в 100% проводимых исследований.	Для оценки специфичности используют контрольные панели образцов. В состав панели входят образцы, содержащие целевую ДНК и не содержащие целевую ДНК (Например, образцы других биологических видов, в том числе близкородственных).
2	Чувствительность ПЦР	Наименьшее содержание копий целевой ДНК, которое может быть определено с использованием данной ПЦР методики, в первую очередь зависит от свойств используемых праймеров и зондов.	Чувствительность должна быть не ниже 100 копий целевой ДНК, например, плазмидной, в одной ПЦР реакции.	Проводят исследования ряда десятикратных разведений целевой плазмидной ДНК с известной концентрацией в двух повторах каждое. Определяют максимальное разведение, при котором ДНК воспроизводимо (в двух повторах) выявляется.
3	Эффективность ПЦР	Характеризует прирост матрицы на каждом цикле амплификации.	Эффективность ПЦР должна быть не ниже 90%. Это соответствуют значению наклона линейной области зависимости Сt от логарифма концентрации ДНК матрицы (slope): не ниже - 3,6 (приемлем диапазон slope 3,1 - 3,6).	Для оценки эффективности ПЦР проводят амплификацию с рядом десятикратных разведений целевой плазмидной ДНК (см п.2). в двух повторах каждое. По результатам амплификации строят график зависимости Сt от логарифма концентрации ДНК матрицы. Определяют наклон линейной области (slope). Эффективность ПЦР оценивают по уравнению: Е = [10(-1/slope)]-1 В идеальном случае - при удвоении количества ПЦР продукта за один цикл: E = 100%, (slope = -3, 32).
4	Предел обнаружения ПЦР-тест системы, (LOD)	Отражает минимальное количество биологического искомого объекта в исследуемом образце, которое может достоверно обнаружить данный метод.	Чем меньше искомого биологического объекта способен выявить метод, тем выше его чувствительность. Определяется экспериментально, но должен составлять не более 0,1%.	Готовят ряд модельных образцов с разным содержанием целевой матрицы. Готовят образцы целевого ГМ ингредиента (от 5% до 0,001 % содержания) в соответствующей матрице. Исследуют приготовленную панель с использованием ПЦР методики. Определяют минимальное содержание ГМО ингредиента в тотальной ДНК организма, при котором ГМО воспроизводимо выявляется (в десяти повторах).
5	Предел количественного определения (LOQ, quantitation limit);	Наименьшее количество (концентрация) вещества в образце, которое может быть количественно оценено с использованием методики с требуемой правильностью и внутри лабораторной прецизионностью.	Для ГМО методик предел должен быть не более 0,1%. На пределе чувствительности относительное стандартное отклонение (RSD) для методик ГМО не должно превышать 20%. Истинное значение измеряемой величины должно входить в полученный при измерениях доверительный интервал.	Исследуют 10 повторов 0,1% ГМО стандарта по ПЦР методике. Рассчитывают среднее значение содержания ГМО в образце и относительное стандартное отклонение (RSD). Сравнивают рассчитанное стандартное отклонение (RSD) с критерием 20% Также оценивают, входит ли истинное значение в доверительный интервал полученного среднего значения.
6	Аналитическая область (dynamic range)	Интервал определяемых аналитических характеристик, в котором получаемые результаты имеют приемлемый уровень правильности и прецизионности. Для ГМО методик обычно приемлем диапазон 0,1% - 5%.	Диапазон 0,1% - 5% ГМО экспериментальных данных, должен удовлетворять линейной модели (см. п. 7)	Проводят исследования образцов с различным содержанием ГМО Оценивают линейность зависимости аналитического сигнала.
7	Линейность	Наличие линейной зависимости аналитического сигнала в анализируемой пробе в пределах аналитической области методики. Оценивается как R2 коэффициент корреляции, определяющий верность модели линейной зависимости Сt от логарифма концентрации калибровочных образцов.	R2 коэффициент для калибровочных образцов должен быть не менее 0,98 %.	Исследуют в двух повторах 0,1%, 1,0 % и 5% калибровочные ГМО стандарты по ПЦР методике. Строят калибровочную прямую (dCt от lgC), оценивают коэффициент корреляции данных с линейной зависимостью (R2).
8	Правильность	Правильность методики характеризуется отклонением среднего результата определений, выполненных с ее использованием, от значения, принимаемого за истинное.	Методика дает корректные результаты, если значения, принимаемые за истинные, лежат внутри доверительных интервалов соответствующих средних результатов анализов, полученных экспериментально по данной методике.	Готовят образцы из калибровочных стандартов 0,1%, 1,0 % и 5% с добавлением матриц различного происхождения (для этого смешивают стандарты с другими ингредиентами, сухим молоком, мясным фаршем, рыбной мукой). Исследуют образцы по ПЦР методике в двух повторах. Оценивают, входит ли истинное значение в диапазон погрешности полученного среднего значения для каждого образца.

При использовании методики, основанной на ПЦР, исследование включает последовательные процессы: подготовку проб, выделение нуклеиновых кислот из образцов, амплификацию заданных фрагментов нуклеиновых кислот, детекцию продуктов амплификации, анализ и интерпретацию результат.