Проект Приказа Министерства сельского хозяйства РФ "Об утверждении методики производства экспертиз (исследований) биологической безопасности генно-инженерно-модифицированных растений для выращивания (выпуска в окружающую среду) на территории Российской Федерации." (подготовлен Минсельхозом России 25.07.2018)

Досье на проект

В соответствии с пунктом 13 Правил государственной регистрации генно-инженерно-модифицированных организмов, предназначенных для выпуска в окружающую среду, а также продукции, полученной с применением таких организмов или содержащей такие организмы, утвержденных постановлением Правительства Российской Федерации от 23.09.2013 N 839 (Собрание законодательства Российской Федерации, 2013, N 39, ст. 4991; 2014, N 25, ст. 3317; 2017, N 28, ст. 4145; 2018, N 6, ст. 896), приказываю:

Утвердить прилагаемую Методику производства экспертиз (исследований) биологической безопасности генно-инженерно-модифицированных растений для выращивания (выпуска в окружающую среду) на территории Российской Федерации.

Министр

Д.Н. Патрушев

Приложение
УТВЕРЖДЕНА
приказом Минсельхоза России
от N           

Методика
производства экспертиз (исследований) биологической безопасности генно-инженерно-модифицированных растений для выращивания (выпуска в окружающую среду) на территории Российской Федерации.

I. Общие положения

1.1. Настоящая методика устанавливает порядок проведения экспертиз (исследований) биологической безопасности генно-инженерно-модифицированных растений, используемых для выращивания (выпуска в окружающую среду) на территории Российской Федерации (далее - ГИМР, экспертиза).

1.1.1. Экспертиза осуществляется в отношении ГИМР с учетом их целевого использования. Для ГИМР предназначенных для производства продовольственного сырья и пищевых продуктов, производства кормов и кормовых добавок для животных, производства лекарственных средств для ветеринарного применения экспертиза осуществляется только после государственной регистрации таких модифицированных организмов. В процессе экспертизы проводят выявление и характеристику угроз, и оценку риска при выпуске - ГИМР в окружающую среду.

1.1.2. Экспертиза распространяется на растения, полученные методами генной инженерии, а также на фрагменты таких растений, способные к репродукции, содержащие рекомбинантную ДНК.

1.1.3. Растения, полученные путем традиционного скрещивания и селекции с использованием одной или нескольких линий ГИМР, прошедших (регистрацию) оценку на биологическую безопасность и получившие разрешение на выпуск в окружающую среду в Российской Федерации, не рассматриваются в данной методике и не проходят оценку на биологическую безопасность.

1.1.4. ГИМР несущие молекулярные стэки (пакетные гены) - полученные одномоментной трансформацией растения единым вектором, несущем конструкцию, содержащую более одного смыслового гена, регулируются так же, как и обычные генно-инженерные организмы, поскольку сутевым образом от них не отличаются. Если одна или более линий, входящих в состав стэка, не прошли государственную регистрацию, то в таком случае, стэк должен регулироваться как новое трансформационное событие.

1.2. Экспертиза проводится организацией (испытательной лабораторией), аккредитованной в национальной системе аккредитации, в целях выявления наличия либо отсутствия негативного воздействия на окружающую среду ГИМР, предназначенного для выпуска в окружающую среду.

1.3. При проведении экспертизы должны учитываться результаты молекулярно-генетического исследования ГИМР. В случаях, упомянутых в пункте 1.1.1. настоящей методики заявитель предоставляет заключение о результатах МГИ. В случае если заявитель не предоставил заключение о результатах МГИ, данное заключение составляется в соответствии с разделом N II, настоящей методики.

1.4. Экспертиза ГИМР для выращивания (выпуска в окружающую среду) на территории Российской Федерации, учитывает результаты оценки риска, проведенных в организациях (испытательных лабораториях), аккредитованных в национальной системе аккредитации. (раздел "IV" настоящей Методики).

1.5. Экспертиза ГИМР для выращивания (выпуска в окружающую среду) на территории Российской Федерации, учитывает результаты испытаний на биобезопасность, проведенных в организациях (испытательных лабораториях), аккредитованных в национальной системе аккредитации. (раздел "V" настоящей Методики).

1.6. Заключение о результатах экспертизы должно быть составлено на основании протоколов исследований ГИМР и содержать:

наименование заключения;

наименование ГИМР с указанием его таксономического статуса;

полное наименование, место нахождения, индивидуальный номер налогоплательщика (ИНН) юридического лица, осуществляющего на территории Российской Федерации генно-инженерную деятельность в целях создания ГИМР (далее - заявитель);

полное наименование и место нахождения юридического лица либо фамилия, имя, отчество (при наличии), место жительства индивидуального предпринимателя - изготовителя ГИМР, представленного на экспертизу;

полное наименование и место нахождения организации (испытательной лаборатории), осуществившей проведение экспертизы;

фамилии, имена, отчества (при наличии) лиц, проводивших экспертизу, ученая степень (звание) (при наличии), места их работы и должности;

сведения о трансформационном событии (характеристики генетической модификации) в виде кода, сформированного согласно Общероссийскому классификатору трансформационных событий;

вид предполагаемого целевого использования ГИМР;

регистрационный номер свидетельства о государственной регистрации ГИМР, предназначенного (предназначенных) для выпуска в окружающую среду, на основе которого (которых) создано ГИМР, в отношении которого проведена экспертиза (в случае если ГИМР создано на основе иного (иных) ГИМР);

регистрационный номер свидетельства о государственной регистрации ГИМР для иного целевого использования (при наличии).

сведения о регистрации ГИМР за рубежом (при наличии);

оценку полноты представленных заявителем документов и данных;

краткое содержание документов и данных, представленных заявителем для проведения экспертизы;

перечень исследований ГИМР с указанием их результатов;

описание представленных заявителем на экспертизу образцов ГИМР и исходного организма-реципиента (традиционного аналога ГИМР) с указанием их количества, а также оценку их пригодности для проведения исследований;

выводы экспертизы о наличии или отсутствии негативного воздействия ГИМР на окружающую среду;

рекомендуемый срок действия свидетельства о государственной регистрации ГИМР (в случае отсутствия сведений о негативном воздействии ГИМР на окружающую среду);

дату и номер заключения экспертизы;

подпись руководителя организации (испытательной лаборатории), осуществившей проведение экспертизы.

1.7. К заключению о результатах экспертизы должны прилагаться протоколы исследований ГИМР, на основании которых оно составлено, подписанные руководителями организаций (испытательных лабораторий) осуществивших проведение исследований.

II. Методика производства молекулярно-генетического исследования генно-инженерно-модифицированных растений, для выращивания (выпуска в окружающую среду) на территории Российской Федерации.

2.1. Общие положения.

2.1.1. Настоящая методика устанавливает порядок проведения молекулярно-генетического исследования генно-инженерно-модифицированных организмов растительного происхождения (ГИМР), предназначенных для выращивания (выпуска в окружающую среду) на территории Российской Федерации (далее - исследование).

2.1.2. Исследование проводится организациями (испытательными лабораториях), аккредитованных в национальной системе аккредитации, в отношении ГИМР предназначенного для выпуска в окружающую среду в целях проверки данных о молекулярно-генетической структуре и генетической модификации ГИМР, оценки эффективности метода идентификации ГИМР либо подтверждения присутствия в объектах окружающей среды заявленного ГИМР.

2.1.3. Результаты исследования ГИМР оформляются заключением о результатах исследования, составляемым на основании протоколов испытаний, которое должно содержать:

наименование заключения;

полное наименование и место нахождения организации (испытательной лаборатории), осуществившей проведение исследования;

наименование ГИМР с указанием его таксономического статуса;

полное наименование и место нахождения, идентификационный номер налогоплательщика (ИНН) юридического лица, осуществляющего на территории Российской Федерации генно-инженерную деятельность в целях создания ГИМР (далее - заявитель ГИМР);

полное наименование и место нахождения юридического лица либо фамилия, имя, отчество (при наличии), место жительства индивидуального предпринимателя - изготовителя образцов ГИМР;

вид предполагаемого целевого использования ГИМР;

сведения о трансформационном событии в виде кода, сформированного согласно Общероссийскому классификатору трансформационных событий;

регистрационный номер свидетельства о государственной регистрации ГИМР, предназначенного (предназначенных) для выпуска в окружающую среду, на основе которого (которых) создано ГИМР, в отношении которого проведена экспертиза (в случае если ГИМР создано на основе иного (иных) ГИМР) либо указание на то, что ГИМР не создан на основе иного (иных) ГИМР;

регистрационный номер свидетельства о государственной регистрации ГИМР для иного целевого использования (при наличии);

сведения о регистрации ГИМР за рубежом (при наличии);

оценку полноты документов и данных, представленных заявителем ГИМР для исследования;

краткое содержание документов и данных, представленных заявителем ГИМР для исследования;

описание образцов ГИМР и исходного организма-реципиента, представленных заявителем ГИМР для исследования с указанием их количества, а также оценку их пригодности для проведения исследования;

выводы о результатах исследования: о молекулярно-генетической структуре ГИМР, об отсутствии или наличии не заявленных генетических конструкций; об эффективности метода идентификации ГИМР, сведения о соответствии генетической модификации природным (естественным) процессам;

фамилии, имена, отчества (при наличии), должности, места работы, ученые степени (при наличии) лиц, проводивших исследование;

дату и номер заключения;

подпись руководителя организации (испытательной лаборатории), осуществившей проведение исследования.

При экспертизе ГИМР, представляется информация о стандартных (референтных) материалах для идентификации ГИМР: наименование стандарта (шифр), источник получения (с указанием ссылки на Интернет-ресурс и адрес производителя).

Протоколы испытаний подписываются руководителями испытательных лабораторий и являются неотъемлемой частью заключения.

Протокол, оформленный по результатам проверки (валидации) методики идентификации ГИМР, подписывается руководителем организации (испытательной лаборатории), осуществившей проведение экспертизы и является неотъемлемой частью заключения.

2.2. Молекулярно-генетические исследования ГИМР.

2.2.1. В рамках исследования осуществляется анализ представленных заявителем ГИМР документов и данных:

а) наименования ГИМР с указанием его таксономического статуса;

б) полного наименования и места нахождения, идентификационного номера налогоплательщика (ИНН) заявителя ГМО;

в) полного наименования и место нахождения юридического лица либо фамилия, имя, отчество (при наличии), места жительства индивидуального предпринимателя - изготовителя образцов ГИМР;

г) вид предполагаемого целевого использования ГИМР;

д) сведений об исходном организме-реципиенте (таксономическая характеристика с указанием метода идентификации);

е) сведений о трансформационном событии в виде кода, сформированного согласно Общероссийскому классификатору трансформационных событий;

ж) информации об организмах-донорах вносимых генов;

з) описания структуры генетической конструкции (внесенной или удаленной) и места ее локализации, характеристики встроенных или измененных генов;

и) информации о генетической модификации: описания метода модификации, структуры вектора, структуры вставки, расположении рекомбинантной ДНК (хромосома, органелла, плазмида, мобильные элементы), включая фланкирующие последовательности, включение в состав мобильных генетических элементов;

к) данных секвенирования вставки ГМО и бордерных последовательностей, не менее 100 нуклеотидов по флангам генома реципиента;

л) регистрационного номера свидетельства о государственной регистрации ГИМР, предназначенного (предназначенных) для выпуска в окружающую среду, на основе которого (которых) создан ГИМР, в отношении которого проведена экспертиза (в случае если ГИМР создано на основе иного (иных) ГИМР) либо указания на то, что ГИМР не создано на основе иного (иных) ГИМР;

м) описания методики, позволяющей идентифицировать генетическую модификацию, в том числе описание нуклеотидных последовательностей используемых праймеров, зондов и условий полимеразной цепной реакции (ПЦР);

н) регистрационного номера свидетельства о государственной регистрации ГИМР для иного целевого использования (при наличии);

о) информации о регистрации ГИМР за рубежом (при наличии).

2.2.2. В рамках исследования осуществляется следующие испытания предоставленных заявителем образцов ГИМР и его немодифицированного аналога:

а) проверка (валидация) методики идентификации ГИМР, в том числе оценка чувствительности и специфичности данной методики в соответствии с критериями эффективности методики идентификации ГИМР, указанными в таблице N1 раздела II настоящей методики;

б) подтверждения присутствия (отсутствия) заявленной генетической модификации в геноме ГИМР;

в) подтверждения присутствия (отсутствия) генетических последовательностей в геноме ГИМР, указанных в таблице N 2 раздела II настоящей методике;

г) проведение секвенирования вставки ГМО и бордерных последовательностей (в случае непредставления заявителем сведений, указанных в абзаце к) пункта 3.1.).

Таблица N 1. Критерии эффективности методики для идентификации ГМО при производстве молекулярно-генетического исследования генно-инженерно-модифицированных организмов

N	Характеристика	Описание характеристики	Критерий	Методы оценки критерия
1	Специфичность ПЦР	Способность ПЦР тест-системы выявлять только целевую ДНК.	ПЦР тест-система должна выявлять целевую ДНК. ПЦР тест-система не должна давать ложноположительных результатов, в том числе выявлять ДНК близкородственных и неродственных биологических видов в 100% проводимых исследований.	Для оценки специфичности используют контрольные панели образцов. В состав панели входят образцы, содержащие целевую ДНК и не содержащие целевую ДНК (Например, образцы других биологических видов, в том числе близкородственных).
2	Чувствительность ПЦР	Наименьшее содержание копий целевой ДНК, которое может быть определено с использованием данной ПЦР методики, в первую очередь зависит от свойств используемых праймеров и зондов.	Чувствительность должна быть не ниже 100 копий целевой ДНК, например, плазмидной, в одной ПЦР реакции.	Проводят исследования ряда десятикратных разведений целевой плазмидной ДНК с известной концентрацией в двух повторах каждое. Определяют максимальное разведение, при котором ДНК воспроизводимо (в двух повторах) выявляется.
3	Эффективность ПЦР	Характеризует прирост матрицы на каждом цикле амплификации.	Эффективность ПЦР должна быть не ниже 90%. Это соответствуют значению наклона линейной области зависимости Сt от логарифма концентрации ДНК матрицы (slope): не ниже - 3,6 (приемлем диапазон slope 3,1 - 3,6)	Для оценки эффективности ПЦР проводят амплификацию с рядом десятикратных разведений целевой плазмидной ДНК (см п.2). в двух повторах каждое. По результатам амплификации строят график зависимости Сt от логарифма концентрации ДНК матрицы. Определяют наклон линейной области (slope). Эффективность ПЦР оценивают по уравнению: Е = [10(-1/slope)]-1 В идеальном случае - при удвоении количества ПЦР продукта за один цикл: E = 100%, (slope = -3, 32).
4	Предел обнаружения ПЦР-тест системы, (LOD)	Отражает минимальное количество биологического искомого объекта в исследуемом образце, которое может достоверно обнаружить данный метод	Чем меньше искомого биологического объекта способен выявить метод, тем выше его чувствительность. Определяется экспериментально, но должен составлять не более 0,1%.	Готовят ряд модельных образцов с разным содержанием целевой матрицы. Готовят образцы целевого ГМ ингредиента (от 5% до 0,001 % содержания) в соответствующей матрице. Исследуют приготовленную панель с использованием ПЦР методики. Определяют минимальное содержание ГМО ингредиента в тотальной ДНК организма, при котором ГМО воспроизводимо выявляется (в десяти повторах).
5	Предел количественного определения (LOQ, quantitation limit);	Наименьшее количество (концентрация) вещества в образце, которое может быть количественно оценено с использованием методики с требуемой правильностью и внутри лабораторной прецизионностью	Для ГМО методик предел должен быть не более 0,1%. На пределе чувствительности относительное стандартное отклонение (RSD) для методик ГМО не должно превышать 20%. Истинное значение измеряемой величины должно входить в полученный при измерениях доверительный интервал.	Исследуют 10 повторов 0,1% ГМО стандарта по ПЦР методике. Рассчитывают среднее значение содержания ГМО в образце и относительное стандартное отклонение (RSD). Сравнивают рассчитанное стандартное отклонение (RSD) с критерием 20% Также оценивают, входит ли истинное значение в доверительный интервал полученного среднего значения.
6	Аналитическая область (dynamic range)	Интервал определяемых аналитических характеристик, в котором получаемые результаты имеют приемлемый уровень правильности и прецизионности. Для ГМО методик обычно приемлем диапазон 0,1% - 5%.	Диапазон 0,1% - 5% ГМО экспериментальных данных, должен удовлетворять линейной модели (см п 7)	Проводят исследования образцов с различным содержанием ГМО Оценивают линейность зависимости аналитического сигнала
7	Линейность	Наличие линейной зависимости аналитического сигнала в анализируемой пробе в пределах аналитической области методики. Оценивается как R2 коэффициент корреляции, определяющий верность модели линейной зависимости Сt от логарифма концентрации калибровочных образцов.	R2 коэффициент для калибровочных образцов должен быть не менее 0,98 %.	Исследуют в двух повторах 0,1%, 1,0 % и 5% калибровочные ГМО стандарты по ПЦР методике. Строят калибровочную прямую (dCt от lgC), оценивают коэффициент корреляции данных с линейной зависимостью (R2).
8	Правильность	Правильность методики характеризуется отклонением среднего результата определений, выполненных с ее использованием, от значения, принимаемого за истинное.	Методика дает корректные результаты, если значения, принимаемые за истинные, лежат внутри доверительных интервалов соответствующих средних результатов анализов, полученных экспериментально по данной методике.	Готовят образцы из калибровочных стандартов 0,1%, 1,0 % и 5% с добавлением матриц различного происхождения (для этого смешивают стандарты с другими ингредиентами, сухим молоком, мясным фаршем, рыбной мукой). Исследуют образцы по ПЦР методике в двух повторах. Оценивают входит ли истинное значение в диапазон погрешности полученного среднего значения для каждого образца.

При использовании методики, основанной на ПЦР, исследование включает последовательные процессы: подготовку проб, выделение нуклеиновых кислот из образцов, амплификацию заданных фрагментов нуклеиновых кислот, детекцию продуктов амплификации, анализ и интерпретацию результатов.

Таблица N 2. Генетические последовательности, потенциально представленные в геноме ГМО растительного происхождения

ПЦР мишень	ГМ линии сои, кукурузы и рапса содержащие данный элемент
Промотор р-CaMV35S	GTS 40-3-2, A2704-12, A5547-127, BT 176, BT11, MON810, GA21, MON88017, NK603, MON863, T25, Т45
Терминатор t-NOS	GTS 40-3-2, MON863, MON531, MON757, MON1076, MON1445, MON1698, MON15985, BT11, GA21, NK603, MON802, 3272, MIR604, MON88017
Промотор р-FMV	MON89788, MON89034, GT73 и др.
Промотор p-SSuAra	MS1, RF1, RF2, MS8xRF3 и др.
Промотор p-TA29	MS1, RF1, RF2, MS8xRF3 и др.
Промотор p-NOS	MS1, RF1, RF2, Topas 19-2 и др.
Терминатор t-E9	MON89788 и др.
Терминатор t-35S	BT 176, Т14, Т25, 3272, A2704-12, A5547-127, Т45, Topas19/2 и др.
Терминатор t-OCS	MS1, RF1, RF2 и др.
Терминатор t-g7	MS1, RF1, RF2, MS8xRF3 и др.
Ген pat	TC1507, 59122 A2704-12, A5547-127, T25, T45, Bt11, DAS-59132-8, 281-24-236 Topas 19/2, DAS-44406-6, SYHT0H2, MZHG0JG, MON 87419 и др.

Выявление регуляторных элементов и целевых генов, используемых для получения ГМО растительного происхождения, осуществляется в соответствии с национальными и (или) межгосударственными стандартами, действующими в Российской Федерации.

III. Оценка риска выращивания (выпуска в окружающую среду) ГИМР на территории Российской Федерации.

3.1. Целью оценки риска является:

- чёткая идентификация потенциальных угроз для окружающей природной среды, сохранения и устойчивого использования биологического разнообразия, возникающих при выпуске ГИМР в окружающую среду в силу проведённой генно-инженерной модификации растения;

- комплексная оценка вероятности и сценариев реализации этих угроз;

- заключение о потенциальном риске и рекомендации относительно статуса биологической безопасности ГИМР.

Первичное определение угроз и оценка риска осуществляются заявителем (разработчиком) ГИМР. В анализе риска необходимо также отмечать потенциальное положительное воздействие (в том числе не целевое) ГИМР на принимающую среду.

Результаты оценки риска подвергаются рассмотрению организацией, осуществляющей экспертизу.

3.2. Общие принципы оценки риска:

- Оценка риска должна осуществляться научно обоснованным и транспарентным образом, и при ее проведении могут учитываться экспертные рекомендации и руководящие положения, разработанные соответствующими международными организациями.

- Отсутствие научных знаний или научного консенсуса не должно обязательно истолковываться как указание на определенный уровень наличия риска, отсутствие риска или приемлемость риска.

- Риски, связанные с ГИМР, должны рассматриваться в контексте рисков, вызываемых исходными немодифицированными реципиентами или родительскими организмами.

- Оценка риска должна осуществляться на индивидуальной основе по особому сценарию в случае каждого конкретного ГИМР трансформационного события. Требуемая информация может отличаться по характеру и уровню детализации в каждом конкретном случае в зависимости от соответствующего ГИМР, его предполагаемого использования и вероятной потенциальной принимающей среды.

Существует ряд общих факторов, которые необходимо учитывать при определении угроз, возникающих при попадании трансгена в окружающую среду.

Такое попадание осуществляется:

- при вертикальном переносе генно-инженерной конструкции;

- при заселении новых территорий (также как при инвазии новых или экзотических видов);

- при горизонтальном переносе генно-инженерной конструкции при помощи микробиологических медиаторов

или при сочетании этих факторов. Таким образом, угрозы и связанные с ними риски возникают в связи с:

- возможными изменениями в естественных экосистемах и воздействием на биологическое разнообразие при использовании ГИМР;

- возможными изменениями в антропогенных экосистемах и воздействием на агробиоразнообразие при использовании ГИМР;

- возможным развитием устойчивости целевых организмов (таких как, например, листогрызущие насекомые) к продуктам экспрессии встроенного гена;

- возможным воздействием продуктов экспрессии встроенного гена на нецелевые организмы;

- изменением устойчивости и популяционных свойств сорняков и дикорастущих родственников ГИМР вследствие переноса в их геном генов от ГИМР;

- возможной рекомбинацией между вирусами растений и вирусными последовательностями трансгенов ГИМР;

- горизонтальным переносом генов от ГИМР к микроорганизмам окружающей среды и его возможные последствия.

В зависимости от типа модификации меняется глубина и приоритетность рассмотрения того или иного фактора. Так, например, воздействие ГИМР на нецелевые организмы (полезные насекомые и организмы из Красной книги) является первостепенным фактором при оценке биологической безопасности ГИМР, содержащих ген токсина Bacillus thuringiensis, так же, как формирование резистентности в популяции вредителя из-за низкого уровня экспрессии токсина. Напротив, инвазивность и передача гена сорнякам и дикорастущим родственным видам становятся главными при рассмотрении ГИМР, устойчивых к абиотическим стрессам, таким как, например, засушливые условия или пониженные температуры.

3.3. Оценка риска включает:

- идентификацию потенциально нецелевых и/или нежелательных воздействий ГИМР на принимающую среду;

- оценку вероятности этих нежелательных эффектов;

- оценку возможных последствий, неблагоприятного воздействия ГИМР, если оно осуществится;

- идентификацию и оценку благоприятных воздействий ГИМР на принимающую среду;

- оценку совокупного влияния последствий выпуска ГИМР в открытую систему и/или его промышленного использования.

3.4. Оценка риска, связанная с целевым использованием ГИМР, должна быть основана на анализе известных научных данных и результатах экспериментальных исследований, касающихся характеристики ГИМР с учетом:

- организма-реципиента;

- организма-донора;

- вектора;

- нового признака(-ов);

- цели и географического расположения места предполагаемого выпуска;

- масштаба выпуска;

- потенциальной принимающей среды;

3.5. В оценке риска учитываются следующие основные критерии:

для организма-реципиента:

- способ размножения и распространения;

- инвазивный потенциал;

- способность к образованию жизнеспособного фертильного потомства с дикорастущими родственными видами и

- сорными растениями;

- способность становиться сорняком;

для организма-донора:

- патогенность;

- токсичность и аллергенность продуктов экспрессии целевого гена;

для вектора:

- молекулярно-биологические характеристики;

- характеристики безопасности;

для рекомбинантной ДНК:

- фрагмент ДНК или полноразмерная копия гена;

- промотор и другие регуляторные последовательности;

- маркерные селективные гены устойчивости к антибиотикам или репортёрные гены;

для экспрессируемого белка:

- токсичность и аллергенность (известные или потенциальные) в отношении человека и организмов - обитателей потенциальной принимающей среды;

- уровень экспрессии;

- специфичность стадии онтогенеза и места экспрессии

для ГИМР:

- соответствие генно-инженерной конструкции (вставки)

заявленной;

- токсичность и аллергенность;

- способность к передаче трансгена другим организмам;

- способность к образованию жизнеспособного фертильного потомства с родственными видами растений и сорняками;

- инвазивный потенциал;

- возможность превращения в сорняк;

- характер взаимодействий между ГИМР и целевыми организмами;

- возможность и характер воздействия ГИМР на нецелевые организмы;

- возможность передачи трансгена в потенциальную принимающую среду (качественная оценка вертикальной и горизонтальной передачи генов); возможность рекомбинации между вирусами растений и вирусными последовательностями трансгенов ГИМР.

Для сельскохозяйственных культур необходимо также оценить:

- способность ГИМР образовывать сохраняющиеся в агроценозе растения-самосевы;

- устойчивость и сохранение репродуктивных свойств в ходе полного сезонного цикла в открытом грунте;

- рекомендуемую удалённость посевов ГИМР от родственных сельскохозяйственных культур, с которыми может произойти скрещивание.

Для потенциальной принимающей среды открытой системы:

- географическое расположение места планируемого выпуска ГИМР;

- особенности, которые могут быть причиной нежелательного воздействия ГИМР;

- удалённость от мест проживания;

- удалённость от центров происхождения и центров разнообразия не модифицированных видов;

- наличие половой совместимости с дикорастущими или сорными видами, произрастающими вблизи места выпуска;

- способность отличных от растений организмов в потенциальной принимающей среде получить гены от ГИМР в результате выпуска;

- данные о природных экосистемах (включая обитающие в них организмы), которые могут взаимодействовать с ГИМР или подвергнуться их воздействию, в том числе, опосредованно.

3.6. Критерии качества и актуальности информации, предоставляемой для оценки риска:

- Для проведения оценки рисков должна использоваться максимально достоверная научная информация, в том числе исходные данные. Качество данных должно соответствовать принятым методам сбора научных доказательств и отчетности, которые могут включать независимую экспертизу методов и схем исследования.

- В соответствующих случаях для усиления доказательности научных выводов оценки риска должны использоваться статистические методы, характеристика которых должна быть приведена в отчете об оценке риска.

- Сведения о полученных данных и применяемых методах должны быть достаточно подробными и транспарентными для проведения их независимой оценки и воспроизведения. Это обеспечивается, среди прочего, доступностью использовавшихся данных для экспертов по оценке риска (например, наличие актуальных данных или информации, или, по требованию в соответствующих случаях, образцов с учётом соглашений о конфиденциальности).

- Информация является актуальной, если её источником являются современные экспериментальные данные, данные из рецензируемых научных литературных источников, а также данные, опыт и результаты предыдущих, официально принятых, оценок риска, особенно в отношении таких же или подобных ГИМР, использовавшихся в аналогичных открытых системах.

- В процессе оценки рисков может использоваться информация из российских и международных стандартов и руководящих указаний, а также знания и опыт, например, сельскохозяйственных производителей, учёных, должностных лиц, в зависимости от вида ГИМР, его предполагаемого целевого использования и потенциальной принимающей среды.

Информация для проведения оценки рисков, будет в каждом конкретном случае различной в зависимости от природы и модификации ГИМР, его предполагаемого использования, масштаба и продолжительности выпуска. В случаях контролируемого выпуска ГИМР с целью получения информации для использования в последующей оценке риска, особенно на ранних экспериментальных стадиях, и при проведении испытаний, объём доступной или требуемой для проведения оценки рисков информации может быть ограничен. Вопросы, возникающие при этом в связи с неопределённостью, обусловленной неполнотой информации должны решаться с применением мониторинга и мер управления риском. Рассмотрение вопросов неопределенности укрепляет научную обоснованность оценки рисков. Это может осуществляться путем рассмотрения ее источников и природы с основным акцентом на те аспекты неопределенности, которые могут в значительной мере повлиять на выводы оценки рисков.

Природа неопределенности может возникать вследствие: (а) недостатка информации, (б) неполноты знаний и (в) биологической изменчивости или вариабельности экспериментальных данных вследствие внутренней гетерогенности сорта/гибрида исследуемого ГИМР, или вариаций в анализируемых пробах. К неопределенности, возникшей в результате недостатка информации, относятся, в частности, неточные или некорректные данные (например, вследствие плана исследования, модели систем или аналитических методов, использующихся для получения, оценки и анализа информации). Рассмотрение и описание различных форм неопределенности осуществляется на каждом этапе оценки риска. В результатах оценки рисков следует приводить количественную и/или качественную характеристику возможного воздействия неопределенности на оцениваемый уровень.

3.7. Рассмотрев информацию, представленную по результатом производства экспертизы биологической безопасности в отношении ГИМР предназначенных для выпуска в окружающую среду на территории Российской Федерации, организация проводившая исследование, формирует заключение об уровне риска в случае каждого конкретного ГИМР для определённых условий его выпуска или использования в открытых системах, и передаёт это заключение в качестве основы для принятия решения о биологической безопасности ГИМР в организацию, осуществляющую экспертизу.

3.8. Организация, осуществляющую экспертизу, может дать заключение о том, что представленная информация недостаточна для оценки риска. В этом случае эта организация может затребовать от заявителя предоставления дополнительной информации и/или рекомендовать заявителю провести дополнительные испытания ГИМР на биологическую безопасность с целью получения такой информации.

IV. Испытания на биологическую безопасность ГИМР для выращивания (выпуска в окружающую среду) на территории Российской Федерации.

4.1. Испытания на биологическую безопасность являются контролируемым выпуском ГИМР в условиях ограниченных и охраняемых экспериментальных участков с применением специальных мер ограничения рисков. (Приложение N2 настоящей Методики)

4.2. Целью испытаний на биологическую безопасность (далее испытаний) является получение экспериментальных данных и информации, необходимых для научно - обоснованной комплексной оценки риска при целевом использовании (выпуске) ГИМР в открытых системах в соответствии с разделом "III" настоящей Методики или для получения дополнительной информации (по требованию организации, осуществляющей экспертизу) при подаче заявки для производства экспертизы биологической безопасности в отношении ГИМР.

4.3. Испытания проводятся организациями, уполномоченными Минсельхозом России на участках, утверждённых приказом Минсельхоза России. Место расположения участка должно соответствовать природно-климатическим условиям предполагаемого места выпуска ГИМР в окружающую среду.

4.4. Минимальные требования, предъявляемые к организации испытаний на биологическую безопасность приведены в Приложении N2 настоящей Методики.

4.5. Общие принципы управления риском при проведении испытаний ГИМР на биологическую безопасность должны соответствовать степени выявленных рисков (раздел "III" настоящей Методики), и включают, в частности:

- охрану опытных участков;

- ограничение доступа к испытаниям неавторизованных лиц;

- использование физических и биологических барьеров на возможных путях распространения биологических материалов и структур;

- применение репродуктивной изоляции посредством:

- пространственного разграничения;

- разделения по времени: выращивание ГИМР, которые начинают цвести до или после того, как отцветут растения ближайших репродуктивно совместимых видов, не вовлеченных в испытания;

- применения биологических методов предотвращения цветения;

- устранения мужских репродуктивных структур;

- надевания изоляторов;

- регулирования устойчивости или распространения таких репродуктивных структур, как побеги или семена;

- уничтожения самосевных растений после уборки, в случае необходимости, ведения борьбы с самосевными растениями в течение более длительных периодов в зависимости от характеристик видов.

- утилизацию (уничтожение) растительного материал по окончании испытаний;

- мониторинг (ГИМР, свойств ГИМР, обусловленных генно-инженерной модификацией, генно-инженерной конструкции);

- разработку планов и мер на случай возникновения непредвиденных ситуаций, связанных с ГИМР.

V. Экспертиза биологической безопасности ГИМР для выращивания (выпуска в окружающую среду) на территории Российской Федерации.

5.1 Экспертиза ГИМР для выращивания (выпуска в окружающую среду) на территории Российской Федерации, включает анализ представленных заявителем документов и данных в соответствии с Приложением N 1 приложения к настоящей методике и обязательную краткую информацию:

а) описание свойств, приобретенных организмом в результате модификации и сведений об исходном организме (таксономическая характеристика с указанием метода идентификации);

б) кода, сформированного согласно Общероссийскому классификатору трансформационных событий, вид целевого использования, объемы и регионы выращивания, наличие государственной регистрации ГИМР в соответствии с видом целевого использования (при наличии);

в) описания структуры генетической конструкции (внесенной или удаленной) и места ее локализации (при наличии), характеристики встроенных или измененных генов;

г) информации о генетической модификации: описание метода модификации, структуры вектора, структуры вставки, расположении рекомбинантной ДНК (хромосома, органелла, плазмида), включая фланкирующие последовательности, характеристику экспрессии встроенных генов в процессе онтогенеза растения, уровень экспрессии в различных тканях растения, различия с исходным организмом;

д) информации об организмах-донорах вносимых генов (таксономическая характеристика, данные о токсических, аллергенных свойствах, группа патогенности при наличии);

е) данных секвенирования вставки ГМО и бордерных последовательностей, не менее 100 нуклеотидов по флангам генома реципиента;

ж) описания методики, позволяющей идентифицировать генетическую модификацию, в том числе описание нуклеотидных последовательностей, используемых праймеров, зондов и условий ПЦР;

и) информации о регистрации ГИМР, в Российской Федерации и/или государствах-членах Евразийского экономического союза и иных государствах.

5.2. Экспертиза ГИМР для выращивания (выпуска в окружающую среду) на территории Российской Федерации, учитывает результаты молекулярно-генетических исследований, проведенных в организациях (испытательных лабораториях), аккредитованных в национальной системе аккредитации.

5.3. Экспертиза ГИМР для выращивания (выпуска в окружающую среду) на территории Российской Федерации, учитывает результаты оценки риска, проведенных в организациях (испытательных лабораториях), аккредитованных в национальной системе аккредитации (раздел "III" настоящей Методики).

5.4. Экспертиза ГИМР для выращивания (выпуска в окружающую среду) на территории Российской Федерации, учитывает результаты испытаний на биобезопасность, проведенных в организациях (испытательных лабораториях), аккредитованных в национальной системе аккредитации. (раздел "IV" настоящей Методики).

5.5. В обязательном порядке заявитель предоставляет для исследования стандартные образцы ГИМР и его традиционного аналога в количестве, достаточном для проведения необходимого объема исследований.

5.6. В случае если результаты исследований, проведенных с протоколами, указанных в подпунктах 5.1 - 5.4 настоящей Методики, не представлены заявителем, данные исследования проводятся организацией, осуществляющей экспертизу.

Заявитель вправе представить любую иную информацию по своему усмотрению.

5.7. Срок проведения экспертизы биологической безопасности не может превышать 90 рабочих дней с момента представления заявителем документов и данных, предусмотренных пунктами 5.1 - 5.4 настоящей Методики.

В случае если исследования проводятся организацией, осуществляющей проведение экспертизы, срок проведения исследований и экспертизы не может превышать 350 рабочих дней с момента представления заявителем образцов ГИМР и немодифицированного аналога. В зависимости от специфики ГИМР, по согласованию с заявителем, срок экспертизы может быть увеличен.

5.8. По результатам экспертизы выдается заключение об отсутствии негативного воздействия ГИМР на окружающую среду, в случае отсутствия изменений в сторону ухудшения состояния окружающей среды по сравнению с воздействием на нее немодифицированного организма.

В заключении об отсутствии негативного воздействия на окружающую среду могут быть указаны специальные условия выпуска и использования ГИМР, в том числе, при соблюдении которых негативное воздействие ГИМР на окружающую среду отсутствует.

5.9. В случаях, не предусмотренных пунктом 3.8. настоящей Методики, выдается заключение о негативном воздействии ГИМР на окружающую среду.

5.10. Если заявителем не представлены документы и данные, предусмотренные подпунктами 5.1 - 5.4 настоящей методики, и (или) образцы ГИМР и исходного организма-реципиента, пригодные для проведения исследований, в количестве, необходимом для проведения исследований (в случае, предусмотренном пунктом 5.5. настоящей методики), экспертиза не должна проводиться. Заявителю должен быть выдан мотивированный отказ в проведении экспертизы, подписанный руководителем организации (испытательной лабораторией), аккредитованной в национальной системе аккредитации, в которую обратился заявитель для проведения экспертизы, в срок, не превышающий 20 рабочих дней с момента обращения заявителя в указанную организацию.

ПРИЛОЖЕНИЕ 1

Информация о ГИМР, предоставляемая заявителем для производства экспертизы биологической безопасности ГИМР для выращивания (выпуска в окружающую среду) на территории Российской Федерации.

1. Общая информация - краткое резюме ГИМР.

2. Генно-инженерно-модифицированное растение - название, код - идентификатор трансформационного события, сформированный согласно Общероссийскому классификатору трансформационных событий, уникальный идентификатор (при наличии), вид целевого использования, объемы и регионы выращивания.

3. При подаче заявки для производства экспертизы биологической безопасности ГИМР, устойчивого к гербициду, прилагается копия свидетельства о регистрации гербицида для применения на данной культуре.

4. Информация об организме - доноре ДНК, растении - реципиенте и генно-инженерно-модифицированном (трансгенном) растении:

4.1. организм - донор:

4.1.1. название (тривиальное и латинское), таксономический статус;

4.1.2. информация о генах - источниках потенциальной:

4.1.2.1.1. - патогенности; - токсичности;

4.1.3. аллергенности;

4.1.4. возможности обмена генами с другими организмами;

4.2. растение реципиент:

4.2.1. латинское название, синонимы;

4.2.2. тривиальное название, синонимы;

4.2.3. таксономия рода;

4.2.4. родственные виды, в том числе сорные;

4.2.5. морфологическое описание;

4.2.6. природные токсины реципиента;

4.2.7. генетика растения-реципиента;

4.2.8. скрещиваемость: гибридизация с дикими родственниками, в том числе в предполагаемых районах выращивания; гибридизация с сельскохозяйственными культурами, в том числе в предполагаемых районах выращивания.

4.2.9. использование организма-реципиента в сельском хозяйстве с указанием агроклиматических зон возделывания;

4.2.10. вредители;

4.2.11. фитопатогены;

4.3. молекулярная характеристика векторов и методов клонирования;

4.4. описание последовательностей ДНК и методов, использованных для введения этих последовательностей в геном растения, включая:

- структурное соответствие интегрированного гена(-ов) природному гену;

- число вставок (число генетических локусов)

- число копий (число копий гетерологичных ДНК в каждом генетическом локусе);

- место интеграции экзогенной ДНК; - целостность вставки;

- отсутствие или наличие гетерологичной ДНК вне границ т-ДНК и/или вне клонируемой вставки;

- селективные маркерные и/или репортёрные гены;

- данные о молекулярной структуре вставки, необходимые для её идентификации в структуре, интегрированной ДНК, включая при необходимости бордер-специфичные праймеры.

4.5. ГИМР:

4.5.1. отличия ГИМР от растения-реципиента (молекулярно-биологические и морфологические);

4.5.2. передача привнесённых свойств и их стабильность в зависимости от числа циклов размножения;

4.5.3. экспрессия трансгена (включая информацию о месте локализации экспрессируемого белка в органах и тканях ГИМР).

4.6. Характеристики экспрессируемого белка:

4.6.1. эквивалентность природному белку (включая метаболические и иммунные характеристики);

4.6.2. токсичность (для человека и организмов - естественных обитателей потенциальной принимающей среды);

4.6.3. аллергенность;

4.6.4. способность к деградации (способы и период распада, токсичность продуктов распада).

5. Условия выпуска ГИМР в открытую систему (или промышленного использования) и описание потенциальной принимающей среды

5.1 цель выпуска (или промышленного использования);

5.2 места выпуска (или промышленного использования);

5.3 дата выпуска (или промышленного использования) ГИМР;

5.4 количество ГИМР;

5.5 агрономические приемы;

5.6 методы удаления трансгенного материала из потенциальной принимающей среды при возникновении необходимости (для полевых испытаний);

5.7 описание места выпуска, включая окружающую местность:

5.7.1 географическое положение;

5.7.2 расстояние до жилья;

5.7.3 локальные флора и фауна;

5.7.4 целевые и не целевые экосистемы.

6. Данные о взаимодействии ГИМР с окружающей средой:

6.1 свойства ГИМР, влияющие на их выживание, неконтролируемое размножение;

6.2 взаимодействие ГИМР с окружающей средой;

6.3 вероятность передачи трансгенов другим организмам;

6.4 взаимодействие ГИМР с целевыми и нецелевыми организмами:

6.4.1 для ГИМР, устойчивых к насекомым-вредителям - воздействие на вредителей и другую фауну (прямое и опосредованное, например, через пищевую цепь);

6.4.2 возможность рекомбинации природных вирусов растений, свойственных потенциальной принимающей среде с вирусной последовательностью трансгена ГИМР (если такая есть);

6.4.3 возможное влияние ГИМР на ризосферу.

7. Для ГИМР, устойчивых к вредителям - стратегия и план мероприятий по предотвращению развития устойчивости (резистентности) вредителей.

8. Резюме оценки риска.

9. Мониторинг и план действий в чрезвычайных ситуациях.

Объём и степень детализации представляемой информации зависит от уровня потенциального риска и может определяться в каждом конкретном случае, как заявителем, так и организацией, проводящей экспертизу.

ПРИЛОЖЕНИЕ 2

Минимальные требования, предъявляемые к организации испытаний ГИМР на биологическую безопасность

1. Требования по предотвращению нежелательной передачи трангена при испытании ГИМР:

а) пространственная изоляция от близкородственных сельскохозяйственных растений:

- для ветроопыляемых культур - не менее 800 метров;

- насекомоопыляемых культур - не менее 1500 метров;

- для самоопыляемых культур - не менее 50 метров;

- для вегетативно-размножающихся культур - не менее 5 метров;

б) защитные посевы сортов растений того же вида вокруг опытных посевов ГИМР:

- для пропашных культур не менее 4 рядов;

- для плодовых, ягодных, древесных декоративных и лесных культур - не менее 1 ряда;

- для культур сплошного сева, не менее 3,6 м.

в) отделение опытного участка лесополосой или мелкоячеистой сеткой;

2. Требования по предотвращению передачи трансгена могут включать следующие мероприятия:

а) прекращение опыта до цветения ГИМР;

б) проведение экспериментов с использованием смещения по времени цветения для биологической изоляции переноса генетической информации между близкородственными растениями;

в) предотвращение цветения (механическое удаление цветков, соцветий или цветущих растений);

г) удаление корневых отпрысков;

д) предотвращение распространения пыльцы (изоляторы, стерильность пыльцы);

е) оборудование опытных участков и (или) делянок укрытиями от проникновения птиц и насекомых (если рекомендовано в разрешении на экспериментальный выпуск).

3. Требования к расположению опытного участка:

а) удаленность от населенных пунктов - не менее 500 м;

б) удаленность от открытых водоемов - не менее чем на 500 м;

в) запрещается размещение опытного участка в заповедниках, заказниках и санаторно-курортных зонах, иных особо охраняемых природных территорий, и на расстоянии менее 1500 метров от их границ.

4. Требования к предотвращению несанкционированного доступа:

а) опытный участок должен находиться на охраняемой территории;

б) опытный участок должен иметь ограждение, исключающее проникновение неуполномоченных лиц, диких и домашних животных;

в) укрытия для древесных или ягодных культур должны иметь запирающиеся входы и выходы;

г) запрещается доступ на опытный участок неуполномоченных лиц.

5. Требования к сбору и уничтожению урожая и растительных остатков ГИМР:

а) сбор и складирование урожая должны осуществляться в пределах опытного участка;

б) метод уничтожения должен обеспечивать 100 процентную утрату жизнеспособности ГИМР;

в) по окончании испытаний должны производиться:

для древесных культур ГИМР - раскорчевка и сжигание, запашка опытного участка (делянки);

- для однолетних и двулетних ГИМР - обработка гербицидами сплошного действия и запашка опытного участка (делянки);

- для плодов и семян - обработка серной кислотой или термическая обработка, или автоклавирование с последующим компостированием.

6. Для предотвращения неконтролируемого распространения ГИМР в следующем по окончании испытаний вегетационном сезоне, на опытном участке должны быть уничтожены все экземпляры проросших ГИМР (ГИМР-самосевов) и растений близкородственных видов, а участок оставлен под чистый пар.

7. Требования к использованию сельскохозяйственной техники:

а) может быть выдвинуто требовании об автономном использовании парка сельскохозяйственной техники, необходимой для выращивания ГИМР;

б) перед въездом на территорию опытного участка и выездом с территории опытного участка с каждой единицы техники должны удаляться растительные остатки и почва;

в) опытный участок должен иметь охраняемый въезд.

8. Требования к хранению и перевозкам образцов ГИМР:

а) запрещается доступ неуполномоченных лиц к образцам ГИМР;

б) хранилище должно обеспечивать сохранность качества и свойств ГИМР;

в) все образцы ГИМР должны быть маркированы и все перемещения образцов должны регистрироваться;

г) тара и упаковка должны обеспечивать невозможность попадания ГИМР в окружающую среду;

д) ввоз образцов ГИМР на территорию Российской Федерации Инструкцией о ввозе на территорию Российской Федерации и вывозе с территории Российской Федерации семян сортов растений и племенного материала пород животных утверждённой Минсельхозпродом Российской Федерации, ГТК РФ 8 мая 1997 г. N 12-04/5/N 01-23/8667

9. Требования к использованию ГИМР:

а) запрещается использовать на корм животным и (или) в пищу ГИМР, полученные в ходе испытаний и не прошедшие государственную регистрацию как корма соответствующего целевого использования и (или) как пищевые продукты;

б) разрешается использовать ГИМР, полученные в ходе испытаний для проведения исследований безвредности и (или) исследований безопасности пищевых продуктов.

10. Требования к мероприятиям по мониторингу опытного участка:

а) мониторинг опытного участка проводится не менее 1 раза в год;

б) отчет о результатах мониторинга опытного участка представляется в Минсельхоз России.

11. Обязанности организации, осуществляющей исследования и персонала организации, осуществляющей исследования на биологическую безопасность.

Персонал обязан иметь соответствующую профессиональную подготовку, неукоснительно соблюдать требования законодательства Российской Федерации в области генно-инженерной деятельности.

Организация, осуществляющая исследования обязана:

а) назначать персонал приказом руководителя организации;

б) произвести инструктаж персонала по соблюдению требований к генно-инженерной деятельности и обеспечению условий биологической безопасности ГИМР на опытных участках;

г) предупредить персонал об ответственности за несоблюдение требований законодательства Российской Федерации в области обеспечения биологической безопасности.

12. Допуск лиц, проводящих мероприятия по контролю (надзору), представителей заинтересованных организаций, на опытный участок производится в сопровождении персонала по письменному распоряжению уполномоченного лица Минсельхоза России и руководителя опытного участка

Испытания проводятся на основе контракта, заключаемого между заявителем (собственником) ГИМР и организацией, осуществляющей испытания на биологическую безопасность. Программа испытаний направляется для уведомления в Минсельхоз России.

Минсельхоз России может осуществлять инспекцию испытаний.

Испытания завершаются отчётом, подаваемым заявителю в Минсельхоз России. Степень детализации информации, представляемой в отчёте, зависит от уровня потенциального риска и может определяться в каждом конкретном случае организацией, проводящей испытания и заявителем.