Проект Приказа Министерства сельского хозяйства РФ "Об утверждении Методических указаний по оценке риска и управлению риском при использовании (выпуске) генно-инженерно-модифицированных животных в открытых системах" (подготовлен Минсельхозом России 25.04.2017)

Досье на проект

Приложение N 3

Утверждена
приказом Минсельхоза России
от ____________ N _________

Методика производства молекулярно-генетического исследования и экспертизы биологической безопасности генно-инженерно-модифицированных животных

I. Область применения

1. Настоящая Методика определяет порядок производства молекулярно-генетического исследования и экспертизы биологической безопасности генно-инженерно-модифицированных животных (далее - ГИМЖ) на территории Российской Федерации, осуществляемых испытательными лабораториями, аккредитованными в национальной системе аккредитации.

II. Общие положения

2. Основная задача настоящей методики указаний заключается в содействии обеспечению надлежащего уровня защиты в области безопасной передачи, обработки и использования живых ГИМЖ, являющихся результатом применения современной биотехнологии и способных оказать неблагоприятное воздействие на сохранение и устойчивое использование биологического разнообразия и на здоровье человека.

3. Методика направлена на оценку риска и разработку мер управления рисками, гарантирующими безопасность ГИМЖ для окружающей среды и здоровья людей, а также предотвращение их неконтролируемого распространения.

4. Методика определяет на территории Российской Федерации требования к проведению оценки безопасности ГИМЖ, необходимые для их государственной регистрации, осуществляемой Россельхознадзором.

5. Методика является обязательной для выполнения российскими и зарубежными субъектами научной, научно-исследовательской и хозяйственной деятельности, независимо от организационно-правовой формы, осуществляющими на территории Российской Федерации деятельность по созданию и использованию, а также совершающими сделки, в том числе внешнеторговые, предметом которых являются ГИМЖ.

6. Методика применяется ко всем вариантам высвобождения ГИМЖ в окружающую среду, в том числе к ограниченным по времени и масштабу, а также широкомасштабным высвобождениям. Тем не менее, количество и тип имеющейся информации, а также информации необходимой для проведения оценок рисков в отношении различных видов преднамеренного высвобождения в окружающую среду, будет различным в каждом конкретном случае.

7. Методика определяет общие критерии оценки риска, возникающего при первом выпуске ГИМЖ в открытую систему на территории Российской Федерации и/или импорте ГИМЖ с целью разведения, а также методологию получения достоверных данных, необходимых для оценки биобезопасности и построения стратегии управления риском.

8. Методика предлагает общие подходы к снижению возможных рисков и предотвращению неконтролируемого распространения ГИМЖ при их использовании/испытаниях в открытых системах.

9. Сроки проведения экспертизы:

рассмотрение заявления - до 30 дней;

полная экспертиза - до 200 дней.

10. Обоснование отрицательного заключения экспертизы.

При отрицательном решении испытательных лабораторий, аккредитованных в национальной системе аккредитации, о возможности промышленного использования регистрируемого ГИМЖ заявителю представляется аргументированный отказ с указанием его причин и путей возможного устранения недостатков.

11. Возможность проведения повторной экспертизы после вынесения отрицательного заключения.

В случае если заявителем устранена причина, в соответствии с которой испытательными лабораториями, аккредитованными в национальной системе аккредитации, было вынесено отрицательное заключение, проведение повторной экспертизы возможно не ранее чем через 30 дней с момента получения такого заключения.

III. Оценка риска, связанного с выпуском ГИМЖ в окружающую среду

12. Целью оценки риска является:

а) идентификация потенциальных угроз ГИМЖ для окружающей среды (включая здоровье человека), сохранения и устойчивого использования биологического разнообразия, возникающих при выпуске ГИМЖ в окружающую среду в силу проведённой генно-инженерной модификации животного;

б) комплексная оценка вероятности и сценариев реализации этих угроз;

в) заключение о потенциальном риске и рекомендации относительно статуса биобезопасности ГИМЖ.

13. Для проведения оценки риска при использовании (выпуске) ГИМЖ в открытых системах следует руководствоваться следующими основными принципами:

а) оценка рисков должна осуществляться научно обоснованным и прозрачным образом, и при ее проведении могут учитываться экспертные рекомендации и руководящие положения, разработанные соответствующими международными организациями;

б) отсутствие научных знаний или единого научного мнения не должно истолковываться как указание на определенный уровень наличия риска, отсутствие риска или приемлемость риска;

в) риски, связанные с живыми измененными организмами или содержащими их продуктами, должны рассматриваться в контексте рисков, вызываемых немодифицированными реципиентами (аналогами) или родительскими организмами в вероятной потенциальной принимающей среде;

г) оценка рисков должна осуществляться на индивидуальной основе. Требуемая информация может отличаться по характеру и уровню детализации в каждом конкретном случае в зависимости от соответствующего живого измененного организма, его предполагаемого использования и вероятной потенциальной принимающей среды;

д) при оценке рисков должна быть описана значимость всех проведенных исследований и идентифицированы все области неопределенности;

е) риски от внедрения ГИМЖ, полученных путем биотехнологий, чаще всего аналогичны рискам от использования немодифицированных организмов или измененных другими способами;

ж) при оценке риска ГИМЖ необходим дифференцированный подход к разным видам организмов. Обычно различают 4 основные группы животных: млекопитающие, птицы, рыбы, насекомые;

з) оценка риска должна повторяться постоянно и пересматриваться с появлением новой информации;

и) требуется проведение научно-обоснованного и осуществляемого на протяжении жизни мониторинга ГИМЖ - система регулярных наблюдений за распространением, численностью, физическим и поведенческим состояниями ГИМЖ, структурой, качеством и площадью среды их обитания.

14. Оценка биобезопасности ГИМЖ включает три основных этапа:

а) выявление и характеристика угроз, и оценка риска при выпуске ГИМЖ в окружающую среду;

б) формирование планов и методов управления рисками, включая мониторинг;

в) принятие решения о биобезопасности ГИМЖ.

15. Определение угроз и оценка риска осуществляются разработчиком ГИМЖ. В анализе риска необходимо также отмечать потенциальное положительное воздействие (в том числе нецелевое) ГИМЖ на принимающую среду и здоровье человека.

16. Риски, связанные с живыми ГИМЖ, содержащими поддающиеся обнаружению новые комбинации воспроизводимого генетического материала, должны рассматриваться в контексте рисков, вызываемых генетически немодифицированными реципиентами или родительскими организмами в вероятной потенциальной принимающей среде.

17. Существует ряд общих факторов, которые необходимо учитывать при определении угроз, возникающих при попадании трансгена в окружающую среду.

18. Попадание трансгена в окружающую среду происходит:

при вертикальном переносе генно-инженерной конструкции;

при заселении новых территорий (также как при инвазии новых или экзотических видов);

при горизонтальном переносе генно-инженерной конструкции при помощи микробиологических медиаторов или при сочетании этих факторов.

19. Риски при использовании и выпуске ГИМЖ в окруюжающую среду:

возможное изменение в природных экосистемах и воздействие на биологическое разнообразие при использовании (выпуске) ГИМЖ;

возможное воздействие продуктов экспрессии встроенного гена на нецелевые организмы;

возможная рекомбинация между вирусами животных и вирусными последовательностями трансгенов ГИМЖ;

горизонтальный перенос генов от ГИМЖ к микроорганизмам окружающей среды и его возможные последствия;

вертикальный перенос генно-инженерной конструкции в живые организмы окружающей среды.

20. Первичная классификация ГИМЖ по уровням риска осуществляется согласно потенциальной опасности содержащегося в них трансгена и используемого для переноса вектора:

ГИМЖ, полученные на основе безвирусных векторов и не несущие очевидной опасности для человека и окружающей среды (векторы - бактериальные плазмиды; гены, кодирующие структурные белки клетки);

ГИМЖ, полученные на основе вирусных векторов, не несущие очевидной опасности для человека и окружающей среды (векторы - элементы вирусных геномов, дефектные вирусы; гены, не кодирующие физиологически активные белки);

ГИМЖ, полученные с помощью вирусных или безвирусных векторов, и несущие потенциальную опасность для человека и окружающей среды (векторы - бактериальные плазмиды или дефектные вирусы; гены, кодирующие гормоны, факторы роста и др. физиологически-активные белки);

ГИМЖ, полученные с помощью вирусных или безвирусных векторов, и несущие гены с предсказуемой опасностью для человека и окружающей среды (гены, кодирующие прионы, онкобелки, продукты вирусных генов и др.).

21. Оценка риска включает:

идентификацию потенциально нежелательных воздействий ГИМЖ на принимающую среду, включая здоровье человека;

оценку вероятности этих нежелательных эффектов;

идентификацию и оценку благоприятных воздействий ГИМЖ на принимающую среду, включая здоровье человека;

оценку совокупного влияния последствий выпуска ГИМЖ в открытую систему и/или его промышленного использования.

22. Для оценки рисков ГИМЖ для окружающей среды необходимы:

молекулярная характеристика вектора, трансгена и его экспрессии в ГИМЖ;

изучение генотипических и фенотипических изменений в ГИМЖ, включая репродуктивность, поведение, здоровье и благополучие ГИМЖ;

изучение стабильности трансгена на протяжении жизни ГИМЖ и его многочисленных поколений;

прогноз возможных непреднамеренных эффектов трансгена на ГИМЖ;

оценка возможности горизонтального переноса генов;

оценка возможных экологических эффектов ГИМЖ, описания мест обитания, эффектов на биоразнообразие;

прямые и непрямые токсикологические и аллергические исследования пищи и кормов, получаемых из ГИМЖ;

демонстрация эффективности и оценки потенциального воздействия на окружающую среду и возможных мер по смягчению последствий, которые могли бы, уменьшить или изменить в желательном направлении выявленные воздействия;

оценка рисков для окружающей среды систематической оценкой экотоксичности и биодеградабельности каждого ингредиента;

описание различий между ГИМЖ и традиционными организмами того же вида в содержании белков, жиров, углеводов, аминокислот, витаминов, минералов и т.п.

23. Оценка риска, связанная с использованием ГИМЖ, должна быть основана на анализе известных научных и эмпирических данных и результатах экспериментальных исследований, касающихся характеристики ГИМЖ с учетом:

организма-реципиента;

организма-донора;

вектора;

нового признака(-ов);

цели и географического расположения места предполагаемого выпуска;

масштаба выпуска;

потенциальной принимающей среды.

24. При оценке риска учитываются следующие основные критерии:

для организма-реципиента:

способ размножения и распространения;

инвазивный потенциал;

способность к образованию жизнеспособного фертильного потомства с дикоживущими родственными видами;

для организма-донора:

патогенность;

токсичность и аллергенность продуктов экспрессии целевого гена;

для вектора:

молекулярно-биологические характеристики;

характеристики безопасности;

для рекомбинантной ДНК:

фрагмент ДНК или полноразмерная копия гена;

промотор и другие регуляторные последовательности;

маркерные селективные гены устойчивости к антибиотикам или репортёрные гены;

для экспрессируемого белка:

токсичность и аллергенность (известные или потенциальные) в отношении человека и организмов - обитателей потенциальной принимающей среды.

для ГИМЖ:

соответствие заявленной генно-инженерной конструкции (вставки);

токсичность и аллергенность;

способность к передаче трансгена другим организмам;

способность к образованию жизнеспособного фертильного потомства с родственными и неродственными видами животных;

инвазивный потенциал;

характер взаимодействий между ГИМЖ и целевыми организмами;

возможность и характер воздействия ГИМЖ на не целевые организмы;

возможность передачи трансгена в потенциальную принимающую среду (качественная оценка вертикальной и горизонтальной передачи генов);

возможность рекомбинации между вирусами животных и вирусными нуклеотидными последовательностями трансгенов ГИМЖ;

возможные трофические цепи.

для потенциальной принимающей среды:

географическое расположение места планируемого выпуска ГИМЖ;

особенности, которые могут быть причиной нежелательного воздействия ГИМЖ;

удалённость от мест проживания;

наличие половой совместимости с животными, проживающими близи места выпуска;

способность отличных от ГИМЖ животных организмов в потенциальной принимающей среде получить гены от генетически-модифицированных животных в результате выпуска;

данные о природных экосистемах (включая обитающие в них организмы), которые могут взаимодействовать с ГИМЖ или подвергнуться их воздействию, в том числе опосредованно.

25. Оценка риска и принятие решения в долгосрочном прогнозе при выпуске ГИМЖ в окружающую среду производятся по особому сценарию в каждом конкретном случае (подход "case by case"). Однако существует ряд общих факторов, которые необходимо учитывать при определении угроз, возникающих при попадании трансгена в окружающую среду.

26. Риски, связанные с живыми измененными организмами и продуктами их метаболизма, т.е. обработанными материалами (фекалии, моча, слюна, кровь, клетки и др.), происходящими от живого измененного организма, должны рассматриваться в сравнении с рисками, вызываемыми генетически немодифицированными организмами в потенциальной принимающей среде (принцип композиционной эквивалентности). Суть этого принципа заключается в сравнении ГИМЖ с исходным традиционным аналогом. Сравнение проводится по содержанию основных пищевых веществ (белков, жиров, углеводов), микронутриентов, минорных непищевых биологически активных компонентов, антиалиментарных и токсичных веществ, аллергенов, характерных для данного вида организмов или определяемых свойствами переносимых генов.

27. Целью сравнительного подхода является выявление изменений между ГИМЖ и сравниваемым организмом (организмами), которые могут привести к неблагоприятному воздействию. Выбор организмов для сравнения может в значительной степени повлиять на актуальность и интерпретацию результатов, полученных в процессе оценки рисков, и выводы, сделанные на их основе. С этой целью необходимо выбрать один или несколько организмов, отобранных для сравнения, с учетом их потенциала для получения актуальной информации, соответствующей задачам оценки рисков. Для учета вариаций, связанных с взаимодействием с окружающей средой, оценку ГИМЖ и сравниваемого с ним организма (организмов), желательно проводить в одно и то же время и в одном и том же месте при одинаковых условиях окружающей среды.

28. Возможно осуществление оценки рисков итерационным способом, когда определенные этапы могут быть пересмотрены при появлении новой информации или изменении обстоятельств, которые могут изменить ее выводы.

29. Рассмотрев представленную информацию, для оценки риска при использовании (выпуске) ГИМЖ в открытой системе, Россельхознадзор формирует заключение о наличии риска в случае каждого конкретного ГИМЖ для определённых условий его выпуска или использования в открытых системах, и передаёт это заключение в качестве основы для принятия решения о биобезопасности ГИМЖ в Минсельхоз России.

IV. Методы, используемые для оценки безопасности

30. Для анализа возможного распространения трансгена (конструкции) в открытых системах (в том числе, при мониторинге) рекомендуется применять два основных подхода или их комбинации:

а) белок-специфичные методы, основанные на детектировании белка, экспрессируемого инкорпорированной ДНК:

- иммуно-ферментный анализ - ELISA (Enzyme linked Immunosorbant Assay), основанный на количественном определении требуемого белка в образце;

- иммунохроматографические экспресс тест-системы на нитроцеллюлозной (бумажной подложке) технологии LFS (Lateral Flow Strip) - иммунохроматография в тонком слое с использованием белок-специфичных антител, использующий различие в подвижности между иммобилизованными и коньюгированными антителами. Может быть рекомендован в качестве первичного "полевого" метода мониторинга/скрининга ГИМЖ;

- иммуноблот - используется для характеристики нативности и идентичности белкового продукта трансгена исходному гену;

б) методы, характеризующие место интеграции в геном чужеродной ДНК и места и уровни экспрессии трансгена:

- ПЦР (Полимеразная цепная реакция);

- гибридизация нуклеиновых кислот (Southern/Northern Blot) при анализе ДНК/РНК-последовательности.

31. Для определения функциональной активности продукта трансгена используются тест-системы на основе культур постнатальных диплоидных фибробластов человека.

32. Для анализа функционального состояния клеток ГИМЖ in vitro рекомендуется получение первичных культур клеток из этого организма.

33. Для исследования иммунологического статуса ГИМЖ необходимо определение иммуноглобулинов в сыворотке крови по гамма-глобулину методом осаждения.

34. Для оценки потенциальной аллергенности, характерной для продуктов метаболизма клеток ГИМЖ, выпускаемых в природу, может быть использована экспериментальная модель системной анафилаксии, возникающей у лабораторных животных (крыс) при их внутрибрюшинной сенсибилизации с последующим введением разрешающей дозы гомологичного белкового антигена внутривенно.

35. При оценке потенциальной аллергенности новых экспрессированных белков учитываются: размер белка (известные аллергены обычно имеют длину не менее 10-40 кД); устойчивость белка к перевариванию и технологической обработке (большинство известных аллергенов медленно перевариваются в желудочно-кишечном тракте и устойчивы при технологической обработке); схожесть структуры белка с таковой у известных аллергенов. Если ген переносится из организма донора, который является аллергеном, необходимо доказать, что получаемый продукт не содержит аллергенов.

36. Для исследования канцерогенного и мутагенного действия на обслуживающий персонал и окружающую среду продуктов метаболизма ГИМЖ используется несколько методов:

тест на абберации хромосом в клетках костного мозга млекопитающих;

тест на канцерогенность на мышах или крысах.

37. Для оценки эмбриотоксичности и тератогенности гомогенат ткани ГИМЖ скармливают беременным крысам. Таким же группам контрольных животных скармливают гомогенат той же ткани животного того же вида. Критериями повреждающего действия продуктов трансгена во время беременности являются:

а) гибель эмбрионов, характеризующая эмбриотоксические свойства;

б) аномалии развития (уродства), характеризующие тератогенный эффект.

38. Хроническую токсичность ГИМЖ следует изучать не менее чем на 2-х видах животных. Группы мелких лабораторных животных должны содержать не менее 10 особей, крупных животных - не менее 4-х. Основным способом введения гомогенатов тканей ГИМЖ является введение через зонд в течение 7 дней в неделю.

39. Исследование влияние трансгена на репродуктивную функцию ГИМЖ cледует проводить путем скрещивания этих животных и, параллельно, животных того же вида, не содержащих трансген. Затем сравниваются показатели между двумя группами животных. Подавление репродуктивной функции может быть связано с несколькими причинами: нарушением гаметогенеза, изменением эндокринной функции половых желез, гипофиза, надпочечников, поражение гипоталламуса, некоторых центров головного мозга и т.п. Нарушение репродуктивной функции может быть как следствием возникновения инсерционной мутации в результате интеграции трансгена в геном, так и следствием экспрессии трансгена, интегрировавшего в геном. В случае попадания ГИМЖ в открытую систему нельзя исключить переноса трансгена в геном местной популяции животных в результате случайного скрещивания, что может привести к изменению генофонда местной популяции. Необходим постоянный мониторинг ГИМЖ для своевременного выявления, предупреждения и устранения последствий негативных процессов и явлений для сохранения биологического разнообразия, обеспечения устойчивого состояния животных и научно обоснованного их использования.

40. Для генетической маркировки ГИМЖ следует использовать методы ДНК-маркирования. Помимо наличия трансгена значимым является наличие геномного паспорта ГИМЖ. Такой подход позволяет более четко идентифицировать случаи неконтролируемого скрещивания животных. Анализ генома используется также для оценки возможных геномных перестроек у ГИМЖ. Рекомендуется проводить мониторинг стабильности генома ГИМЖ, заключающийся в анализе гипервариабельных последовательностей у реципиента, у ГИМЖ сразу после его получения и у ГИМЖ на разных стадиях онтогенеза.

41. В дополнение к информации о характеристиках родительского ГИМЖ нужно рассмотреть и оценить конкретную информацию о потенциале взаимодействий между трансгенами и другими генетическими элементами (например, промоторами и другими регулирующими элементами), белками, метаболитами или измененными признаками и эндогенными генами и их продуктами в пакетированном ГИМЖ. Особое внимание при этом нужно обращать на трансгены, которые принадлежат к одним и тем же биохимическим путям или физиологическим процессам.

V. Испытания на биобезопасность

42. Испытания на безопасность являются контролируемым выпуском ГИМЖ в условиях ограниченных и охраняемых экспериментальных участков с применением специальных мер ограничения рисков.

43. Целью испытаний на биобезопасность является получение экспериментальных данных и информации, необходимых для научно-обоснованной комплексной оценки риска при использовании (выпуске) ГИМЖ в открытых системах или для получения дополнительной информации в соответствии с пунктом 12 Правил государственной регистрации генно-инженерно-модифицированных организмов, предназначенных для выпуска в окружающую среду, а также продукции, полученной с применением таких организмов или содержащей такие организмы, утвержденных постановлением Правительства Российской Федерации от 23 сентября 2013 г. N 839 "О государственной регистрации генно-инженерно-модифицированных организмов, предназначенных для выпуска в окружающую среду, а также продукции, полученной с применением таких организмов или содержащей такие организмы" при подаче заявки на государственную регистрацию ГИМЖ.

44. Испытания проводятся на участках, соответствующих природно-климатическим условиям предполагаемого места выпуска ГИМЖ в окружающую среду.

45. Испытания проводятся на основе контракта, заключаемого между собственником ГИМЖ (и/или заявителем) и центром по испытаниям генно-инженерно-модифицированных организмов на безопасность. Программа испытаний направляется для уведомления в Экспертный совет.

Испытания завершаются отчётом, подаваемым в Экспертный совет. Степень детализации информации, представляемой в отчёте, зависит от уровня потенциального риска и может определяться в каждом конкретном случае заявителем (собственником) и/или Экспертным советом.

Общие принципы минимизации рисков при проведении испытаний ГИМЖ на безопасность должны соответствовать степени ранее выявленных рисков.

46. Организации, осуществляющие испытания на биобезопасность, должны учитывать следующие минимальные требования:

требования по предотвращению нежелательной передачи трансгена при испытании ГИМЖ;

требования к расположению опытного участка;

требования к предотвращению несанкционированного доступа к опытному участку;

требования к безопасному хранению и перевозкам образцов ГИМЖ;

требования к использованию ГИМЖ;

требования к мероприятиям по мониторингу опытного участка;

требования к персоналу, осуществляющему исследования.

VI. Рекомендации по уменьшению риска

47. Одна из основных проблем - объединение оценки риска (определение вероятности реализации потенциальной угрозы) с системой управления риском - системой принятия решения и мониторинга риска, где социально-экономические и культурные факторы могут играть решающую роль в определении соотношения "риск/выгода" и, соответственно, приемлемости риска (стало быть, и самого генно-инженерно-модифицированного организма). Несмотря на то, что эти две составные части определения биобезопасности взаимно информативны и дополняют друг друга, следует всячески стремиться разделять их с тем, чтобы в результате иметь возможность принять объективное и научно-обоснованное решение о биобезопасности того или иного организма.

48. При выпуске ГИМЖ в окружающую среду тип мер по уменьшению рисков, подлежащих применению, должен соответствовать степени выявленных рисков.

Разработчики каждого нового ГИМЖ должны сами разработать меры по уменьшению риска с учетом особенностей конкретного генетически-модифицированного организма и предоставить информацию об этом.

49. В настоящее время разработанные мировой практикой критерии теоретически позволяют минимизировать вредные последствия, связанные с теми или иными ГИМЖ. При создании ГИМЖ разработчик руководствуется соображениями полезности привнесенных модификаций. Это связано в первую очередь с увеличением плодовитости организмов, повышением их продуктивных свойств, устойчивостью к различным заболеваниям, способностью производить полезные для человека вещества и др. Наряду с заданными фенотипическими признаками ГИМЖ могут обладать непредвиденными свойствами, вредными или для человека, или/и для популяции животных того же вида, в случае их неконтролируемого скрещивания (синтез компонентов, вызывающих аллергические реакции, появление опасных соединений, обладающих мутагенным, канцерогенным или токсическим эффектом). К негативным явлениям может быть отнесено появление у ГИМЖ таких свойств как нарушение процесса воспроизводства, злокачественные перерождения, повышенная агрессивность, вирусная инфекция и др.

50. Общие рекомендации по уменьшению допустимого риска на начальном этапе является содержание ГИМЖ в изолированном от человека и других особей данного вида положении:

персонал, обслуживающий ГИМЖ, должен использовать средства защиты в соответствии с требованиями, которые определяются в зависимости от природы трансгена и особенностей ГИМЖ;

использование продуктов ГИМЖ оговорено специальными Методическими указаниями (Медико-биологическая оценка пищевой продукции, полученной из генетически модифицированных источников.);

ГИМЖ должны содержаться, использоваться, подвергаться транспортировке, уничтожению и захоронению в условиях существования физических барьеров, предотвращающих контакт таких животных с населением, а также с окружающей средой вне замкнутой системы. На этом этапе должны использоваться карантинные правила содержания различных ГИМЖ (дрозофила, рыбы, куры, мыши, крысы, кролики, овцы, козы, свиньи, коровы), которые соответствуют имеющимся правилам карантинного содержания генетически немодифицированных животных.

51. К общим мерам предосторожности можно отнести:

обеспечение соответствующего информирования и подготовка лиц, которые будут заниматься ГИМЖ;

применение процедуры контроля, по которой можно принять соответствующие меры в случае неожиданных последствий в ходе или после высвобождения;

осуществление контроля за распространением освобожденных ГИМЖ и их потомства в окружающую среду оттоком генов из выпущенных ГИМЖ;

обеспечение контроля за доступом к месту высвобождения;

ограничение перемещения с помощью таких физических средств как заборы, фильтры, островки, водные преграды, садки и др.;

применение репродуктивной изоляции за счет использования стерильных ГИМЖ;

изоляция ГИМЖ от диких животных тех же видов;

регулирование устойчивости или распространения таких репродуктивных структур как личинки или яйца.

52. ГИМЖ на стадии их создания и оценки риска должны быть строго изолированы от окружающей среды. Содержание и уход за различными классами ГИМЖ (млекопитающие, птицы, рыбы, насекомые) оговариваются специальными правилами, одобренными Минсельхозом России для содержания немодифицированных животных организмов.

53. Необходимы физические, химические и биологические способы защиты.

Например, физической защитой в случае млекопитающих должен был предусмотрен электрический забор, двойной барьер, внутренний ров, окруженный буферными зонами.

Для птиц и насекомых необходима установка сети над местом проведения исследования и содержания ГИМЖ. Для рыб требуются специальные электрические и механические фильтры, предотвращающие выход ГИМЖ во внешние водоемы.

В качестве химической защиты может быть предусмотрена дезинфекция, использование пестицидов.

Для биологической защиты половозрелые самцы и самки должны содержаться отдельно, может быть применено кастрирование животных или использование в экспериментах животных одного пола, чтобы исключить размножение, использование для этой цели сезонности циклов и др.

Например, при создании генетически-модифицированных комаров существует две стратегии: самоограничения и самораспространения. Первая стратегия призвана обеспечить контроль москитов-переносчиков путем подавления роста их популяций или снижения их компетентности. С этой целью создаются генно-инженерно-модифицированные москиты, неспособные производить жизнеспособное потомство. Это достигается, например, путем прерывания развития потомства на стадии личинки. Другие подходы к самоограничению нацелены на регулирование метаболических процессов москитов-переносчиков и ослабление их приспособленности, что способствует сокращению их популяций. Стратегия самораспространения способствует распространению и жизнестойкости трансгена через популяции москитов того же вида. В отличие от стратегии самоограничения генно-инженерно-модифицированные москиты, полученные в рамках стратегий самораспространения, должны быть наследуемыми и распространяться через целевую популяцию и, соответственно, обладать жизнестойкостью в экосистеме, как минимум, в течение среднего по продолжительности срока. Таким образом, целью стратегий самораспространения является замена популяции немодифицированных москитов популяцией генетически-модифицированных москитов, обладающих меньшей способностью к передаче болезней.

54. Утилизация и уничтожение погибших ГИМЖ осуществляется в соответствии с Ветеринарно-санитарными правилами сбора, утилизации и уничтожения биологических отходов, утвержденными Главным государственным ветеринарным инспектором Российской Федерации 4 декабря 1995 г. N 13-7-2/469.

55. Любой ученый, принимающий участие в исследовании ГИМЖ, должен иметь соответствующее образование, квалификацию и опыт, необходимые для выполнения задачи в полном объёме.

Приложение N 1
к Методическим указаниям по оценке
риска и управлению риском при использовании (выпуске)
генно-инженерно-модифицированных
животных в открытых системах

Материалы, предоставляемые заявителем в Россельхознадзор при подаче заявки на государственную регистрацию ГИМЖ

1. Общая информация (заявитель, авторы, собственники, контактные телефоны, адреса).

2. Генно-инженерно-модифицированное животное - название, идентификатор трансформационного события.

3. Информация об организме-доноре ДНК и животном-реципиенте:

3.1. организм - донор:

3.1.1. название (тривиальное и латинское), таксономический статус;

3.1.2. информация о генах - источниках потенциальной:

- патогенности;

- токсичности;

- аллергенности;

3.1.3. возможности обмена генами с другими организмами;

3.2. животное-реципиент:

3.2.1. латинское название, синонимы;

3.2.2. тривиальное название, синонимы;

3.2.3. таксономия рода;

3.2.4. родственные виды;

3.2.5. морфологическое описание;

3.2.6. генетика животного-реципиента;

3.2.7. скрещиваемость:

- гибридизация с дикими родственниками, в том числе в предполагаемых районах выпуска;

- гибридизация с сельскохозяйственными животными, в том числе в предполагаемых районах выпуска;

3.2.8. использование организма-реципиента в сельском хозяйстве;

4. Молекулярная характеристика векторов и методов клонирования:

4.1. описание нуклеотидных последовательностей ДНК и методов, использованных для введения этой ДНК в геном животного, включая:

- структурное соответствие интегрированного гена(-ов) природному гену;

- число вставок (число генетических локусов)

- число копий (число копий гетерологичных ДНК в каждом генетическом локусе);

- место интеграции экзогенной ДНК;

- целостность вставки;

- селективные маркерные и/или репортёрные гены;

- данные о молекулярной структуре вставки, необходимые для её идентификации в структуре интегрированной ДНК, включая, при необходимости, специфичные праймеры.

5. Генно-инженерно-модифицированное животное:

5.1. отличия генетически модифицированного животного от животного-реципиента (молекулярно-биологические и морфологические);

5.2. передача привнесённых свойств и их стабильность в зависимости от числа циклов размножения;

5.3. экспрессия трансгена (включая распределение содержания экспрессируемого белка в ГИМЖ).

5.4. характеристики экспрессируемого белка:

5.4.1 эквивалентность природному белку (включая метаболические и иммунные характеристики);

5.4.2. токсичность (для человека и организмов - естественных обитателей потенциальной принимающей среды);

5.4.3. аллергенность;

5.4.4. способность к деградации (способы и период распада, токсичность продуктов распада).

6. Условия выпуска трансгенного животного в открытую систему (или промышленного использования) и описание потенциальной принимающей среды:

6.1. цель выпуска (или промышленного использования);

6.2. места выпуска (или промышленного использования);

6.3. дата выпуска (или промышленного использования) ГИМЖ;

6.4. количество ГИМЖ;

6.5. методы удаления трансгенного материала из потенциальной принимающей среды при возникновении необходимости;

6.6. описание места выпуска, включая окружающую местность:

6.6.1. географическое положение;

6.6.2. расстояние до жилья;

6.6.3. локальная флора и фауна;

6.6.4. целевые и не целевые экосистемы.

7. Данные о взаимодействии ГИМЖ с окружающей средой:

7.1. свойства ГИМЖ, влияющие на их выживание, неконтролируемое размножение;

7.2. взаимодействие ГИМР с окружающей средой;

7.3. вероятность передачи трансгенов другим организмам;

7.4. взаимодействие ГИМЖ с целевыми и нецелевыми организмами:

7.4.1. прямое или опосредованное влияние ГИМЖ через пищевую цепь;

7.4.2. возможность рекомбинации природных вирусов животных, свойственных потенциальной принимающей среде, с вирусной нуклеотидной последовательностью трансгена ГИМЖ (если такая есть);

7.4.3. возможное влияние ГИМЖ на экологию принимающей среды.

8. Стратегия и план мероприятий по предотвращению потенциальных угроз.

9. Резюме оценки риска.

10. Мониторинг и план действий в чрезвычайных ситуациях.

Объём и степень детализации представляемой информации зависит от уровня потенциального риска и может определяться в каждом конкретном случае Экспертным советом.